HiMedia MT001-50X5ML Модифицированный бульон Миддлбрук 7H9 (50×5 мл)

Готовая к применению питательная среда HiMedia MT001-50X5ML Модифицированный бульон Миддлбрук 7H9 (50×5 мл) — двухкомпонентная система для культивирования микобактерий с биологическим индикатором роста. Среда предназначена для обогащения и выявления роста Mycobacterium tuberculosis при инкубации при 35–37 °C с наблюдением каждые третьи сутки; хранение — при 2–8 °C.

Назначение

Модифицированный бульон Миддлбрук 7H9 с индикатором предназначен для культивирования микобактерий из деконтаминированных и концентрированных образцов. Антибиотический коктейль PACT подавляет или замедляет рост сопутствующей загрязняющей микрофлоры.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: MT001-50X5ML
• Назначение изделия: бульон
• Объём: 5 мл
• Форма поставки: единый комплект из двух компонентов, готовых к подготовке и использованию
• Компонент 1: основа бульона Миддлбрук 7H9
• Компонент 2: модифицированная селективная обогатительная добавка, лиофилизированная
• Индикатор: биологический индикатор роста
• Температура инкубации: 35–37 °C
• Продолжительность наблюдения за культуральной реакцией: до 2–4 недель
• Периодичность наблюдения: каждые третьи сутки
• Объём посевного материала: 50–300 мкл
• Условия хранения: 2–8 °C
• Срок годности: использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке

Подготовка среды

Восстановление модифицированного обогатительного комплекса

1. Восстановите модифицированную селективную обогатительную добавку с использованием 1 мл стерильной дистиллированной воды.
2. Соблюдая правила асептики, перенесите восстановленную модифицированную селективную обогатительную добавку в основу бульона Миддлбрук 7H9.
3. Полученная смесь представляет собой готовую модифицированную среду — бульон Миддлбрук 7H9 с индикатором.

Методика проведения анализа

1. Соблюдая правила асептики, внесите 50–300 мкл деконтаминированного и концентрированного образца в модифицированный бульон Миддлбрук 7H9 с индикатором с использованием калиброванного устройства.
2. Объём посевного материала должен быть обратно пропорционален исходному содержанию Mycobacterium tuberculosis в образце.
3. Тщательно перемешайте среду с образцом.
4. Инкубируйте при 35–37 °C.
5. Наблюдайте наличие роста каждые третьи сутки.

Принцип действия и интерпретация

Модифицированный бульон Миддлбрук 7H9 с индикатором представляет собой модификацию бульона Миддлбрук 7H9, разработанного Миддлбруком и соавторами.

В состав среды введён фактор, стимулирующий рост и ускоряющий развитие микобактерий. Биологический индикатор позволяет визуально различать рост уже через 6 суток; в большинстве случаев рост наблюдается в среднем через 10–14 суток.

Антибиотический коктейль PACT, присутствующий в системе, устраняет или задерживает рост загрязняющей микрофлоры.

Основа бульона содержит неорганические соли, поддерживающие рост микобактерий. Цитрат натрия в среде превращается в лимонную кислоту, которая удерживает определённые неорганические катионы в растворе. Основа бульона дополнена компонентами, необходимыми для роста микобактерий.

Обогатительная добавка содержит:

• бычий альбумин;
• декстрозу;
• каталазу;
• хлорид натрия.

Некоторые свободные жирные кислоты токсичны для микобактерий, однако альбумин связывает эти жирные кислоты и предотвращает их токсическое воздействие на микобактерии. Токсичные пероксиды, присутствующие в среде, разрушаются каталазой. Декстроза служит источником энергии, а хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Глицерин усиливает рост микобактерий.

Контроль качества

Внешний вид

Реагент поставляется как единый комплект из двух компонентов.

• Основа бульона Миддлбрук 7H9: прозрачный раствор светло-жёлтого цвета.
• Модифицированная селективная обогатительная добавка, лиофилизированная: порошок от бежевого до светло-розового цвета.

Культуральная реакция

Культуральную реакцию оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 2–4 недель; наличие роста наблюдают каждые третьи сутки.

• Тест-культура: Mycobacterium tuberculosis H37RV (25618).
• Положительная реакция: зернистый осадок пурпурно-розового цвета.
• Подтверждение: микроскопия и другие тесты.

Испытание на стерильность

• Результат: соответствует критериям выпуска.

Условия хранения и срок годности

Хранить при температуре 2–8 °C. Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.