HiMedia MT001-25X5ML Модифицированный бульон Миддлбрук 7H9 (25×5 мл)

Питательная среда HiMedia MT001-25X5ML Модифицированный бульон Миддлбрук 7H9 (25×5 мл) — готовая к применению двухкомпонентная система с модифицированной селективной добавкой и биологическим индикатором. Используется для обогащения и выращивания микобактерий из деконтаминированных концентрированных образцов при инкубации 35–37 °C; хранение среды — при 2–8 °C.

Назначение и состав системы

Реагент поставляется как единая готовая к применению двухкомпонентная система, включающая:

• основу бульона Миддлбрук 7H9;
• модифицированную селективную добавку в лиофилизированной форме.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: MT001-25X5ML
• Назначение: питательная жидкая среда для обогащения и выращивания микобактерий
• Форма поставки: двухкомпонентная система
• Объём единицы: 5 мл
• Количество: 25 × 5 мл
• Основа среды: бульон Миддлбрук 7H9
• Селективная добавка: модифицированная селективная добавка, лиофилизированная
• Температура хранения: 2–8 °C
• Срок годности: использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке

Приготовление среды

Приготовление модифицированного бульона Миддлбрук 7H9 с индикатором выполняют непосредственно перед использованием.

1. Восстановите модифицированную селективную добавку, добавив 1 мл стерильной дистиллированной воды.
2. Асептически перенесите восстановленную модифицированную селективную добавку в основу бульона Миддлбрук 7H9.
3. После переноса добавки полученная среда готова к применению как модифицированный бульон Миддлбрук 7H9 с индикатором.

Протокол анализа

1. Асептически внесите 50–300 мкл деконтаминированного и концентрированного образца в модифицированный бульон Миддлбрук 7H9 с индикатором, используя калиброванное устройство.
2. Объём посевного материала должен быть обратно пропорционален исходному количеству Mycobacterium tuberculosis в образце.
3. Тщательно перемешайте содержимое.
4. Инкубируйте при 35–37 °C.
5. Наблюдайте наличие роста каждые третьи сутки.

Принцип действия и интерпретация

Модифицированный бульон Миддлбрук 7H9 с индикатором представляет собой модификацию бульона Миддлбрук 7H9, разработанного Миддлбруком и соавторами.

• В состав среды введён фактор, стимулирующий рост, который ускоряет развитие микобактерий.
• Биологический индикатор позволяет визуально выявлять рост; различимый рост может быть обнаружен уже через 6 суток, а в большинстве случаев — в среднем через 10–14 суток.
• Антибиотический комплекс PACT, присутствующий в системе, устраняет или подавляет рост посторонней микрофлоры.
• Неорганические соли, входящие в состав среды, поддерживают рост микобактерий.
• Цитрат натрия превращается в среде в лимонную кислоту, которая удерживает определённые неорганические катионы в растворе.
• Основа бульона дополнена компонентами, необходимыми для роста микобактерий.
• Обогащающая добавка содержит бычий альбумин, декстрозу, каталазу и хлорид натрия.
• Некоторые свободные жирные кислоты токсичны для микобактерий; альбумин связывает эти жирные кислоты и предотвращает их токсическое действие.
• Токсичные пероксиды, присутствующие в среде, разрушаются каталазой.
• Декстроза служит источником энергии.
• Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.
• Глицерин усиливает рост микобактерий.

Контроль качества

Внешний вид компонентов

Реагент поставляется как единая готовая к применению двухкомпонентная система.

• Основа бульона Миддлбрук 7H9: прозрачный раствор светло-жёлтого цвета.
• Модифицированная селективная обогащающая добавка, лиофилизированная: порошок от бежевого до светло-розового цвета.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 2–4 недель; наличие роста контролируют каждые третьи сутки.

• Тест-культура: Mycobacterium tuberculosis H37RV (25618)
• Результат: гранулярный осадок пурпурно-розового цвета
• Подтверждение: результат необходимо подтвердить микроскопией и другими тестами

Испытание на стерильность

• Результат: соответствует критериям выпуска.

Условия хранения

Хранить при температуре 2–8 °C. Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Область применения

Среда предназначена для микробиологических исследований, связанных с обогащением и выявлением роста микобактерий в деконтаминированных концентрированных образцах. При работе необходимо соблюдать асептические условия, использовать калиброванное дозирующее устройство и проводить наблюдение за ростом каждые третьи сутки в течение инкубации.