HiMedia MM083-100G Фиолетовый бульон МакКонки с BCP

Селективная питательная среда HiMedia MM083-100G Фиолетовый бульон МакКонки с BCP предназначена для предположительной идентификации Escherichia coli из фармацевтических препаратов в соответствии с Индийской фармакопеей 2014 года; значение pH после стерилизации при 25 °C составляет 7,3 ± 0,2. Бульон применяют для выявления лактозосбраживающих колиформных микроорганизмов, при этом обезвоженная бычья желчь подавляет рост грамположительных организмов, а рабочую среду инкубируют при 43–45 °C в течение 24–48 ч.

Назначение

Medium 7 «Бульон МакКонки» применяют для селективной предположительной идентификации Escherichia coli из фармацевтических препаратов в соответствии с Индийской фармакопеей 2014 года. Индийская фармакопея также рекомендует среду для предположительной идентификации колиформных микроорганизмов в воде и других материалах санитарного контроля.

Состав

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами рабочих характеристик.

Основа желатинового пептона — панкреатический перевар желатина.

Принцип действия и интерпретация

Бульон МакКонки представляет собой модификацию среды МакКонки. Нейтральный красный обладает ингибирующим действием, поэтому в составе среды его заменили менее ингибирующим красителем — бромкрезоловым пурпурным (BCP), который более чувствителен к изменениям pH среды.

Функции компонентов:

• желатиновый пептон обеспечивает микроорганизмы необходимыми питательными веществами для роста;
• лактоза является сбраживаемым углеводом;
• обезвоженная бычья желчь ингибирует грамположительные микроорганизмы;
• бромкрезоловый пурпурный служит индикатором pH.

Лактозосбраживающие микроорганизмы вызывают пожелтение среды вследствие снижения pH при ферментации лактозы. Лактозонесбраживающие микроорганизмы, включая Salmonella и Shigella, не изменяют внешний вид среды. Образующийся газ улавливается в перевёрнутой трубке Дюранта.

После переноса образца и инкубации рост красных, обычно немукозных колоний, иногда окружённых зоной красноватого осадка, указывает на наличие колиформных микроорганизмов.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 35,01 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте среду в пробирки с перевёрнутыми трубками Дюранта.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C и давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа) в течение 15 мин либо в соответствии с валидированным циклом стерилизации.

Указанная методика соответствует действующему изданию фармакопеи. Установленный срок годности рассчитан с учётом этого издания; пользователь должен проверить совместимость методики с последним действующим изданием фармакопеи.

Методика проведения анализа

1. Перенесите гомогенат в бульон с переваром казеина и сои (Casein Soyabean Digest Broth, MM011), содержащий 1 г или 1 мл исследуемого препарата, добавленного к 100 мл бульона МакКонки.
2. Инкубируйте посевы при 43–45 °C в течение 24–48 ч.
3. Для дальнейшего выделения выполните пересев на агар МакКонки (MM081).
4. Интерпретируйте появление красных, обычно немукозных колоний, иногда с зоной красноватого осадка, как признак наличия колиформных микроорганизмов.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид сухой среды: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: раствор фиолетового цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий, в пробирках.

pH

pH приготовленной среды: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Контроль стимулирования роста выполняют в соответствии с методикой Индийской фармакопеи. Для микроорганизмов, не указанных в фармакопее, культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение 18–48 ч.

Для ингибирующих свойств: рост тестового микроорганизма при заданной температуре не должен наблюдаться в течение периода, равного или превышающего максимальный установленный период инкубации, при внесении не менее 100 КОЕ; условия испытания — 42–44 °C в течение не менее 48 ч.

Стимулирующие рост свойства

Чётко видимый рост микроорганизма, сопоставимый с ростом, ранее полученным на протестированной и одобренной партии среды, должен наблюдаться при заданной температуре в течение периода, не превышающего минимальный установленный период инкубации, при внесении не более 100 КОЕ; условия испытания — 42–44 °C в течение не более 24 ч.

Ингибирующие свойства

Технические характеристики

Хранение и срок годности

• Сухую среду хранить при температуре ниже 30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Приготовленную среду хранить при 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.