ЕЕ бульон Мосселя для накопления энтеробактерий HiMedia MH287-500G (уп/500 гр)

Питательная микробиологическая среда ЕЕ бульон Мосселя для накопления энтеробактерий HiMedia MH287-500G (уп/500 гр) — селективный обогащающий бульон для энтеробактерий. Применяется при микробиологическом контроле фармацевтических образцов и требует термической обработки при 100 °C в течение 30 мин без автоклавирования.

Назначение

ЕЕ бульон Мосселя HiMedia MH287-500G предназначен для селективного накопления представителей семейства Enterobacteriaceae из фармацевтических образцов в соответствии с гармонизированной методикой испытаний на микробиологические пределы по USP/EP/BP/JP/IP.

Тип образца: фармацевтические образцы.

Среда также применяется для обогащения желчеустойчивых грамотрицательных бактерий при микробиологическом исследовании пищевых продуктов и кормов для животных.

Состав

Состав, г/л:

Пептон из желатина: панкреатический перевар желатина.

Обезвоженная бычья желчь.

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Семейство Enterobacteriaceae включает Salmonella, Shigella и другие кишечные патогены. Эти микроорганизмы могут попадать в пищевую систему через воду, загрязнённую фекалиями. Большинство таких микроорганизмов может быть удалено в ходе строгих процессов пищевого производства, однако часть клеток может получить сублетальные повреждения вследствие изменения pH, воздействия пара или высокой температуры и других неблагоприятных факторов.

Поэтому важной частью мониторинга пищевых продуктов является выявление и количественный учёт повреждённых клеток после их ресусцитации. ЕЕ бульон Мосселя, разработанный Mossel и соавторами, рекомендован в качестве обогащающей среды для желчеустойчивых грамотрицательных бактерий при микробиологическом исследовании пищевых продуктов и кормов для животных.

Среда приготовлена в соответствии с гармонизированной методикой USP/EP/BP/JP/IP.

• Пептон из желатина и глюкозы моногидрат обеспечивают рост большинства представителей Enterobacteriaceae.
• Бриллиантовый зелёный и обезвоженная желчь подавляют рост грамположительных бактерий.
• Фосфаты выполняют функцию буферной системы и нейтрализуют кислоты, образуемые лактозоферментирующими микроорганизмами; без нейтрализации эти кислоты могли бы неблагоприятно влиять на рост микроорганизмов.
• Лактозоотрицательные, анаэрогенные лактозоположительные или поздно ферментирующие лактозу энтеробактерии часто не выявляются стандартным тестом на коли-аэрогенес.
• Для устранения этого ограничения лактоза в составе среды заменена глюкозой.
• Фосфаты формируют буферную систему среды.

Клетки, повреждённые при высушивании или низком pH, перед накоплением в ЕЕ бульоне ресуспендируют в хорошо аэрируемом соево-казеиновом бульоне MH011 в течение 2 ч при 25 °C. Процедура ресусцитации рекомендована для сухих пищевых продуктов, кормов для животных и полуконсервированных пищевых продуктов.

ЕЕ бульон является обогащающим бульоном и должен использоваться совместно с агаром с фиолетово-красной желчью и глюкозой MH581.

Методика приготовления среды

1. Взвесьте 42,93 г сухой среды — эквивалентное количество обезвоженной среды на 1 л.
2. Приготовьте суспензию в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
3. Разлейте среду по пробиркам или колбам в необходимом объёме.
4. Нагревайте среду в свободно проходящем пару или в кипящей воде при 100 °C в течение 30 мин.
5. Немедленно охладите приготовленную среду.
6. Не автоклавируйте среду.

Методика проведения анализа

1. После начальной инкубации обогащённой пробы в ЕЕ бульоне при 30–35 °C в течение 24 ч перенесите петлю обогащённого материала на агар с фиолетово-красной желчью и глюкозой MH581.
2. Используйте десятичные разведения гомогената пищевого продукта, если ожидаемое количество микроорганизмов высокое; в остальных случаях используйте исходную суспензию.
3. Типичные розовые колонии, выросшие на MH581, пересейте для биохимического подтверждения.
4. Проведите подтверждение с использованием оксидазной реакции и реакций ферментации.

Технические характеристики

• Наименование среды: ЕЕ бульон Мосселя для накопления энтеробактерий.
• Артикул: MH287-500G.
• Назначение изделия: бульон.
• Масса упаковки: 500 г.
• Эквивалентное количество обезвоженной среды: 42,93 г/л.
• Производитель: HiMedia.
• Регистрационное обозначение: ФСЗ 2009/03706.
• Соответствие фармакопейным методикам: USP/EP/BP/JP/IP.
• pH после нагревания (при 25 °C): 7,2 ± 0,2.
• Диапазон pH приготовленной среды: 7,00–7,40.
• Цвет сухой среды: от светло-жёлтого до зеленовато-жёлтого.
• Состояние сухой среды: однородный, свободно сыпучий порошок.
• Цвет приготовленной среды: изумрудно-зелёный.
• Прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор без осадка.
• Температура приготовления: 100 °C.
• Время нагревания: 30 мин.
• Автоклавирование: не допускается.
• Температура инкубации: 30–35 °C.
• Период начальной инкубации в ЕЕ бульоне: 24 ч.
• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–30 °C.
• Условия хранения после вскрытия: в сухом виде, в плотно закрытой ёмкости.
• Срок хранения: использовать до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.

Пересев и восстановление повреждённых клеток

Для клеток, повреждённых высушиванием или воздействием низкого pH, предусмотрена ресусцитация в хорошо аэрируемом соево-казеиновом бульоне MH011:

• Среда для ресусцитации: соево-казеиновый бульон MH011.
• Температура ресусцитации: 25 °C.
• Время ресусцитации: 2 ч.
• Последующая операция: обогащение в ЕЕ бульоне Мосселя.

Ресусцитация рекомендована для сухих пищевых продуктов, кормов для животных и полуконсервированных пищевых продуктов.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или зеленовато-жёлтый однородный свободно сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Раствор изумрудно-зелёного цвета, прозрачный, без осадка.

pH

pH: 7,00–7,40.

Тест на ростовые свойства

Тест на ростовые свойства проводят в соответствии с гармонизированной методикой USP/EP/BP/JP/IP. Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение установленного времени.

Ростовые свойства

Ростовые свойства подтверждаются, если при заданной температуре за период, не превышающий минимальный установленный период, появляется хорошо различимый рост микроорганизмов, сопоставимый с ростом, ранее полученным для предварительно протестированной и утверждённой партии среды.

Условия испытания:

• Посевная доза: ≤100 КОЕ.
• Температура: 30–35 °C.
• Время инкубации: ≤24 ч.

Ингибирующие свойства