Обогатительный бульон для энтеробактерий Моссель HiMedia MH287-100G — обезвоженная питательная среда для селективного обогащения Enterobacteriaceae из фармацевтических образцов. HiMedia MH287-100G применяется при микробиологическом контроле фармацевтической продукции; приготовленную среду нельзя автоклавировать, а хранить сухую среду следует при 10–30 °C.

Назначение

Среда рекомендована для селективного обогащения Enterobacteriaceae из фармацевтических продуктов при микробиологическом контроле по гармонизированной методике USP/EP/BP/JP/IP.

Тип образца: фармацевтические образцы.

Бульон EE Мосселя (MH287) используют совместно с агаром с фиолетовым красным и желчью и глюкозой MH581 для последующего выделения и подтверждения микроорганизмов.

Состав

Состав, г/л:

Панкреатический перевар желатина.

Обезвоженная бычья желчь.

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности среды.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 42,93 г сухой среды — эквивалентную массу обезвоженной среды на 1 л — в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Разлейте среду по пробиркам или колбам в требуемом объёме.
3. Нагревайте в свободно циркулирующем паре или кипящей воде при 100 °C в течение 30 мин.
4. Немедленно охладите приготовленную среду.
5. Не автоклавируйте среду.

Принцип действия и интерпретация

Семейство Enterobacteriaceae включает Salmonella, Shigella и другие кишечные патогены. Эти микроорганизмы могут попадать в пищевую систему через воду, загрязнённую фекалиями. Большинство таких микроорганизмов может быть удалено при строгих параметрах пищевой обработки, однако часть клеток может получить сублетальные повреждения из-за изменения pH, воздействия пара или нагревания и других неблагоприятных условий.

Поэтому важной задачей контроля пищевой продукции является выявление и количественный учёт повреждённых клеток после их ресусцитации. Бульон EE Мосселя, разработанный по методике Мосселя и соавторов, рекомендован в качестве обогатительной среды для желчеустойчивых грамотрицательных бактерий при биологическом исследовании пищевых продуктов и кормов для животных.

Среда приготовлена в соответствии с гармонизированной методикой USP/EP/BP/JP/IP. Пептонат желатина и моногидрат глюкозы обеспечивают рост большинства представителей Enterobacteriaceae. Бриллиантовый зелёный и обезвоженная желчь действуют как ингибирующие агенты в отношении грамположительных бактерий. Фосфаты выполняют функцию буферной системы и нейтрализуют кислоты, образующиеся при ферментации лактозы; без нейтрализации эти кислоты могли бы отрицательно влиять на рост микроорганизмов.

Лактозонегативные, лактозоположительные анаэрогенные или поздно ферментирующие лактозу представители Enterobacteriaceae часто не выявляются стандартным тестом на коли-аэрогенес. Для устранения этой проблемы в составе среды лактоза заменена глюкозой. Фосфаты формируют буферную систему среды.

Клетки, повреждённые при высушивании или воздействии низкого pH, ресусцитируют в хорошо аэрируемом соево-казеиновом переварном бульоне MH011 в течение 2 ч при 25 °C перед обогащением в бульоне EE. Процедура ресусцитации рекомендована для сухих пищевых продуктов, кормов для животных и полуконсервированных пищевых продуктов.

Бульон EE является обогатительной средой и должен применяться совместно с агаром с фиолетовым красным и желчью и глюкозой MH581. После первоначальной инкубации в бульоне EE при 30–35 °C в течение 24 ч обогащённую пробу пересевают петлёй на агар MH581. Типичные розовые колонии с MH581 пересевают для биохимического подтверждения с использованием реакций на оксидазу и ферментацию.

Десятичные разведения гомогената пищевого продукта используют при ожидаемом высоком количестве микроорганизмов; в остальных случаях применяют исходную суспензию.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для фармацевтических образцов необходимо применять соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с руководствами USP/EP/BP/JP/IP. После использования загрязнённые материалы перед утилизацией необходимо стерилизовать автоклавированием.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или зеленовато-жёлтый однородный, свободно сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Раствор изумрудно-зелёного цвета, прозрачный, без осадка.

pH

pH: 7,00–7,40.

Тест на ростовые свойства

Тест на ростовые свойства проводят в соответствии с гармонизированной методикой USP/EP/BP/JP/IP. Культуральную реакцию оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение установленного времени.

Ростовые свойства

Хорошо видимый рост микроорганизма, сопоставимый с ростом, ранее полученным на протестированной и одобренной серии среды, должен наблюдаться при указанной температуре не позднее минимального периода времени, установленного методикой, при посевной дозе ≤100 КОЕ и инкубации при 30–35 °C не более 24 ч.

Ингибирующие свойства

Рост тестового микроорганизма не должен наблюдаться в течение периода времени не менее максимального срока, установленного методикой, при посевной дозе ≥103 КОЕ и инкубации при 30–35 °C не менее 48 ч.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 ч.