Питательная селективная среда МакКонки бульон HiMedia MH083-500G (уп/500 гр) для обогащения Escherichia coli в фармацевтических образцах, содержащая 34,51 г сухой среды на 1 л. Применяется для микробиологического контроля фармацевтической продукции; лактозоферментирующие микроорганизмы вызывают изменение цвета среды на жёлтый.

Назначение

МакКонки бульон предназначен для селективного обогащения Escherichia coli из фармацевтических образцов при микробиологическом контроле по гармонизированной методике USP/EP/BP/JP. Тип образца: фармацевтические образцы.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Пептонатический ферментативный гидролизат желатина.

Эквивалентен обезвоженной бычьей желчи.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 34,51 г сухой среды, что соответствует эквивалентной массе обезвоженной среды на 1 л, в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагревайте до полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду в пробирки с перевёрнутыми трубками Дюрхема.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,103 МПа, и температуре 121 °C в течение 15 мин либо по валидированному циклу стерилизации.

Принцип действия и интерпретация результатов

МакКонки бульон представляет собой модификацию среды МакКонки. Нейтральный красный обладает ингибирующим действием, поэтому он заменён менее ингибирующим красителем — бромкрезоловым пурпурным. Бромкрезоловый пурпурный более чувствителен к изменениям pH среды.

• Пептон из желатина обеспечивает микроорганизмы необходимыми питательными веществами для роста.
• Лактоза является сбраживаемым углеводом.
• Обезвоженная желчь подавляет рост грамположительных микроорганизмов.
• Бромкрезоловый пурпурный служит индикатором pH и приобретает жёлтую окраску в кислой среде.
• Лактозоферментирующие микроорганизмы вызывают пожелтение среды вследствие образования кислоты при ферментации лактозы.
• Изменение окраски красителя наблюдается при снижении pH среды ниже 6,8.
• Лактозонеферментирующие микроорганизмы, например Salmonella и Shigella, не изменяют внешний вид среды.

Среда приготовлена в соответствии с гармонизированной методикой USP/BP/JP.

Проведение обогащения и дальнейшего выделения

1. Перенесите гомогенат, содержащий 1 г или 1 мл исследуемого препарата, в 100 мл среды для переваривания соево-казеинового белка MH011 и МакКонки бульона.
2. Инкубируйте при 43–45 °C в течение 24–48 ч.
3. Для дальнейшего выделения выполните пересев на агар МакКонки MH081.
4. Рост красных, обычно немукозных колоний, иногда окружённых зоной красноватого осадка, указывает на присутствие колиформных бактерий.

Методика работы с образцами

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры безопасности

Перед вскрытием контейнера прочитайте маркировку. При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности при работе с образцами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Отдельные микроорганизмы различаются по требованиям к условиям роста и могут демонстрировать различные характеры роста на среде.
2. Каждая серия среды испытана на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). При работе с конкретным микроорганизмом, не указанным в COA, рекомендуется валидировать среду с учётом специфических требований пользователя.
3. Несмотря на то что среда рекомендована для селективного выделения, для окончательного подтверждения необходимо дополнительно выполнить биохимические и серологические исследования.
4. Для дальнейшего выделения требуется пересев на агар МакКонки MH081.

Условия результативности

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке, до истечения срока годности и при хранении в рекомендованных условиях.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, легко сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета с зеленоватым оттенком.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный или слегка опалесцирующий раствор фиолетового цвета в пробирках.

pH

pH приготовленной среды: 7,10–7,50.

Свойства, обеспечивающие рост

Контроль стимуляции роста проводят в соответствии с гармонизированной методикой USP/EP/BP/JP. Для микроорганизмов, не указанных в фармакопеях, культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение 18–48 ч.

Чётко видимый рост микроорганизма, сопоставимый с ростом, ранее полученным на испытанной и одобренной серии среды, должен наблюдаться при заданной температуре не позднее минимального времени, установленного методикой, при посевной дозе ≤100 КОЕ; для указанного испытания — при 42–44 °C в течение ≤24 ч.

Ингибирующие свойства

Рост тест-микроорганизма не должен наблюдаться при заданной температуре в течение не менее максимального времени, установленного методикой, при посевной дозе ≥100 КОЕ; для указанного испытания — при 42–44 °C в течение ≥48 ч.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение 18–48 ч.

Дополнительные микробиологические испытания

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее известен как Enterobacter aerogenes.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–30 °C.
• Использовать до даты истечения срока годности, указанной