Порошковая питательная среда HiMedia MH083-2.5KG Бульон МакКонки массой 2,5 кг предназначена для селективного обогащения Escherichia coli в фармацевтических образцах. Среда применяется при микробиологическом контроле фармацевтической продукции; инкубацию проводят при 43–45 °C в течение 24–48 ч.

Назначение и область применения

Бульон МакКонки предназначен для селективного обогащения Escherichia coli из фармацевтических образцов при испытаниях на микробиологические пределы по гармонизированной методике фармакопей USP/EP/BP/JP.

• Тип образца: фармацевтические образцы
• Назначение: селективное обогащение Escherichia coli
• Форма выпуска: порошок
• Масса: 2,5 кг
• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: гармонизированный
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Панкреатический перевар желатина.

Эквивалентен обезвоженной бычьей желчи.

Принцип действия и интерпретация результатов

Бульон МакКонки представляет собой модификацию среды МакКонки. Нейтральный красный обладает ингибирующим действием, поэтому в составе среды он заменён менее ингибирующим красителем — бромкрезоловым пурпурным (BCP), который более чувствителен к изменениям pH среды.

• Пептонат желатина обеспечивает микроорганизмы необходимыми питательными веществами для роста.
• Лактоза является ферментируемым углеводом.
• Обезвоженная желчь подавляет рост грамположительных микроорганизмов.
• Бромкрезоловый пурпурный служит индикатором pH и приобретает жёлтую окраску в кислой среде.
• Микроорганизмы, ферментирующие лактозу, вызывают закисление среды и её окрашивание в жёлтый цвет.
• Изменение окраски индикатора наблюдается при снижении pH среды ниже 6,8.
• Микроорганизмы, не ферментирующие лактозу, включая Salmonella и Shigella, не изменяют внешний вид среды.

Гармонизированная методика предусматривает перенос гомогената из соево-казеиновой переварной среды (MH011), содержащего 1 г или 1 мл исследуемого препарата, в 100 мл бульона МакКонки. Инкубацию проводят при 43–45 °C в течение 24–48 ч. Для дальнейшего выделения выполняют пересев на агар МакКонки (MH081). Рост красных, обычно немукозных колоний, иногда окружённых зоной красноватого осадка, указывает на присутствие колиформных микроорганизмов.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 34,51 г сухой среды, что соответствует эквивалентной массе обезвоженной среды на 1 л, в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте среду в пробирки, установив перевёрнутые трубки Дюрхема.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин либо по валидированному циклу стерилизации.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методики отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Кремовый или жёлтый порошок с зеленоватым оттенком, однородный, сыпучий, без комков.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Раствор в пробирках фиолетового цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Значение pH

• pH: 7,10–7,50

Свойства, стимулирующие рост

Контроль стимуляции роста проводят в соответствии с гармонизированной методикой USP/EP/BP/JP.

Для микроорганизмов, не указанных в фармакопеях, культуральную реакцию оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение 18–48 ч.

Явно видимый рост микроорганизма, сопоставимый с ростом, ранее полученным на испытанной и одобренной партии среды, должен наблюдаться при заданной температуре не позднее минимального времени инкубации, указанного для метода, при внесении посевной дозы ≤100 КОЕ. Условия испытания: 42–44 °C, ≤24 ч.

Ингибирующие свойства

Рост тестового микроорганизма не должен наблюдаться при заданной температуре в течение не менее максимального времени инкубации, указанного для метода, при внесении посевной дозы ≥100 КОЕ. Условия испытания: 42–44 °C, ≥48 ч.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение 18–48 ч.

Дополнительное микробиологическое испытание

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее известен как Enterobacter aerogenes.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковую картину роста на среде.
2. Каждая партия среды испытана на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). Для любого конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, рекомендуется валидировать среду с учётом задач пользователя.
3. Несмотря на рекомендацию среды для селективного выделения микроорганизмов, для окончательного подтверждения необходимо выполнить дополнительные биохимические и серологические исследования.
4. Для дальнейшего выделения требуется пересев на агар МакКонки (MH081).

Эксплуатация, хранение и срок годности

Рабочие характеристики среды гарантируются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в