Питательная микробиологическая среда HiMedia MCD1713-500G HiCrome M-TEC HiCynth бульон — сухой хромогенный порошок для анализа воды методом мембранной фильтрации. Среда предназначена для выявления и количественного определения термотолерантных Escherichia coli с образованием колоний пурпурно-пурпурно-красного цвета после инкубации при 44,5 ± 0,2 °C в течение 22–24 ч.

Назначение

HiCrome® M-TEC HiCynth™ бульон предназначен для дифференциации и количественного определения термотолерантных Escherichia coli в пробах воды методом мембранной фильтрации.

• Тип образца: пробы воды
• Назначение изделия: бульон
• Масса: 500 г
• Физическая форма: порошок
• Тип продукта: HiCynth™, HiCrome™
• Происхождение пептона: химически определённый состав, HiCynth™
• Тип упаковки: ПЭВП (HDPE)

Состав

Формула на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

— химически определённый пептон.

Принцип измерения и интерпретация

HiCrome® M-TEC HiCynth™ бульон является хромогенной средой для выявления и количественного определения термотолерантных Escherichia coli (TEC) в воде методом мембранной фильтрации. Среда представляет собой модификацию агара M-TEC, разработанного Dufour.

В состав модифицированной среды входит хромоген 5-бром-6-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронид. Фермент β-D-глюкуронидаза, продуцируемый штаммами Escherichia coli, расщепляет хромоген с образованием глюкуроновой кислоты. В результате колонии Escherichia coli приобретают пурпурную или пурпурно-красную окраску.

В HiCrome® M-TEC HiCynth™ бульоне пептоны животного происхождения полностью заменены химически определёнными пептонами для исключения рисков, связанных с BSE/TSE/GMO, характерных для животных пептонов.

Функции компонентов среды:

• Пептон HiCynth™ № 3 и пептон HiCynth™ № 5: источники углерода и азота, аминокислот с длинной цепью, витаминов и необходимых питательных веществ.
• Лактоза: сбраживаемый углевод.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотическое равновесие.
• Дигидрофосфат калия и гидрофосфат калия двузамещённый: образуют буферную систему, регулирующую pH при ферментативном процессе.
• Лаурилсульфат натрия и дезоксихолат натрия: повышают селективность среды за счёт ингибирования грамположительных бактерий.

В отличие от исходной среды M-TEC, HiCrome® M-TEC HiCynth™ бульон использует химически определённые пептоны вместо пептонов животного происхождения.

Методика проведения анализа

1. Взвесьте 30,6 г сухой среды.
2. Суспендируйте навеску в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
3. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
4. Стерилизуйте среду автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (15 psi; ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Асептически внесите требуемое количество бульона — 2–5 мл — на стерильную абсорбирующую ватную подложку до полного насыщения.
7. Используйте регидратированную среду в течение 24 ч после восстановления.

Мембранная фильтрация и инкубация

1. Насытьте стерильную абсорбирующую ватную подложку приблизительно 2 мл HiCrome® M-TEC HiCynth™ бульона.
2. После пропускания пробы воды через мембранный фильтр асептически поместите фильтр на насыщенную подложку фильтрующей поверхностью вверх.
3. Инкубируйте подложку с мембранным фильтром при 44,5 ± 0,2 °C в течение 22–24 ч.
4. После инкубации учитывайте колонии Escherichia coli пурпурной или пурпурно-красной окраски на мембранном фильтре.

Технические характеристики

• Концентрация для приготовления среды: 30,6 г/1000 мл
• Реакция: реакция 3,06 % масс./об. водного раствора при 25 °C
• pH: 7,10–7,50
• Номинальное значение pH: 7,3 ± 0,2
• Температура инкубации при культуральном контроле: 44,3–44,7 °C
• Продолжительность инкубации при культуральном контроле: 22–24 ч
• Температура стерилизации: 121 °C
• Время стерилизации: 15 мин
• Давление стерилизации: 15 psi, ориентировочно 0,103 МПа
• Температура охлаждения перед внесением на подложку: 45–50 °C
• Срок использования среды после регидратации: не более 24 ч
• Материал упаковки: ПЭВП (HDPE)

Контроль качества

Внешний вид

Кремовый или жёлтый однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор светло-янтарного цвета в пробирках.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики учитывают после инкубации при 44,3–44,7 °C в течение 22–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Сбор и обработка образцов

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно действующим руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. β-D-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов Escherichia coli, однако отдельные штаммы Escherichia coli могут быть β-D-глюкуронидазоотрицательными.
2. Некоторые виды микроорганизмов могут расти слабо из-за различий в пищевых потребностях.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 15–25 °C.
• Условия хранения сухой среды: плотно закрытая ёмкость.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия плотно закрывайте флакон и храните продукт в сухом виде.
• Храните среду в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте ёмкость.
• При поглощении влаги возможно образование комков; ненадлежащее хранение может привести к комкованию порошка.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в