HiMedia MCD1713-100G HiCrome M-TEC HiCynth бульон

Хромогенный бульон HiMedia MCD1713-100G HiCrome M-TEC HiCynth для дифференциации и подсчёта термотолерантных штаммов Escherichia coli в воде. Применяется методом мембранной фильтрации; содержит химически определенные пептоны HiCynth™ для исключения рисков BSE/TSE/GMO.

Принцип измерения

Определение основано на использовании хромогенного субстрата 5-бром-6-хлоро-3-индолил-β-D-глюкуронида. Фермент β-D-глюкуронидаза, вырабатываемый штаммами E. coli, расщепляет этот субстрат с образованием глюкуроновой кислоты, что придает колониям E. coli характерный пурпурно-малиновый цвет.

Бульон является модификацией агара M-TEC. В состав входят:

• Пептоны HiCynth™ №3 и №5: источники углерода, азота, длинноцепочечных аминокислот, витаминов и основных питательных веществ.
• Лактоза: ферментируемый углевод.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.
• Дигидрофосфат калия и гидрофосфат калия: создают буферную систему для контроля pH при ферментативном воздействии.
• Лаурилсульфат натрия и дезоксихолат натрия: селективные агенты, ингибирующие рост грамположительных бактерий.

Методика проведения анализа

1. Подготовьте стерильную абсорбирующую хлопковую подушечку, насытив её примерно 2 мл бульона HiCrome® M-TEC HiCynth™.
2. Асептически поместите мембранный фильтр, через который была пропущена проба воды, на насыщенную подушечку лицевой стороной вверх.
3. Инкубируйте образец при температуре 44,5 ± 0,2 °C в течение 22–24 часов.
4. После инкубации оцените наличие колоний E. coli пурпурного или малинового цвета на мембранном фильтре.

Приготовление и стерилизация

1. Растворите 30,6 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте раствор до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈ 0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Асептически нанесите необходимый объём (2–5 мл бульона) на стерильную абсорбирующую хлопковую подушечку для насыщения.
6. Используйте среду в течение 24 часов после восстановления.

Технические характеристики

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 44,3–44,7 °C в течение 22–24 часов.

* — соответствующие номера WDCM.

Состав, г/л

Область применения и ограничения

Применяется для анализа проб воды. Ограничения:

• $\beta$-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E. coli; отдельные штаммы могут быть отрицательными по данному признаку.
• Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост из-за вариаций в питательных потребностях.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C в сухом вентилируемом месте, защищенном от источников возгорания и экстремальных температур. Из-за гигроскопичности продукта плотно закрывайте крышку во избежание комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Утилизация: использованные или непригодные материалы подлежат стерилизации в автоклаве или сжиганию в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.