Питательная микробиологическая среда HiMedia MCD1713-100G HiCrome M-TEC HiCynth бульон предназначена для дифференциации и количественного определения термотолерантных Escherichia coli в воде методом мембранной фильтрации. Бульон применяется для анализа проб воды с инкубацией при 44,5 ± 0,2 °C в течение 22–24 ч; ограничением метода является возможное отсутствие β-D-глюкуронидазы у части штаммов E. coli.

Назначение

HiCrome® M-TEC HiCynth™ бульон рекомендован для дифференциации и количественного определения термотолерантных Escherichia coli в пробах воды методом мембранной фильтрации.

Тип образца: пробы воды.

Состав

Норма внесения компонентов — г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

— пептон с химически определённым составом.

Принцип измерения и интерпретация результатов

HiCrome® M-TEC HiCynth™ бульон представляет собой хромогенную питательную среду для обнаружения и количественного определения термотолерантных Escherichia coli (TEC) в воде методом мембранной фильтрации. Среда является модификацией агара M-TEC, разработанного Dufour.

В состав модифицированной среды входит хромоген 5-бром-6-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронид. Фермент β-D-глюкуронидаза, вырабатываемый штаммами E. coli, расщепляет хромоген с образованием глюкуроновой кислоты. В результате колонии E. coli на мембранном фильтре приобретают пурпурно-пурпурно-красную окраску.

В HiCrome® M-TEC HiCynth™ бульоне пептоны животного происхождения полностью заменены пептонами с химически определённым составом. Это позволяет исключить риски, связанные с пептонами животного происхождения, включая губчатую энцефалопатию крупного рогатого скота (BSE), трансмиссивные губчатые энцефалопатии (TSE) и генетически модифицированные организмы (GMO).

Пептоны HiCynth™ № 3 и HiCynth™ № 5 обеспечивают среду источниками углерода и азота, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и необходимыми питательными веществами. Лактоза является сбраживаемым углеводом. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Дигидрофосфат калия и гидрофосфат дикалия формируют буферную систему, регулирующую pH при ферментативных процессах. Лаурилсульфат натрия и дезоксихолат натрия повышают селективность среды за счёт подавления грамположительных бактерий.

Техническое отличие от агара M-TEC: HiCrome® M-TEC HiCynth™ выпускается в форме бульона и использует пептоны с химически определённым составом вместо пептонов животного происхождения.

Методика проведения анализа

1. Приготовьте среду: суспендируйте 30,6 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду в автоклаве. Основной режим стерилизации: 121 °C в течение 15 мин; давление — 15 фунтов на кв. дюйм (ориентировочно ≈0,103 МПа).
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Асептически внесите необходимое количество бульона — 2–5 мл — на стерильную абсорбирующую ватную подложку для её насыщения.
6. Насытьте стерильную абсорбирующую ватную подложку примерно 2 мл HiCrome® M-TEC HiCynth™ бульона.
7. После пропускания пробы воды через мембранный фильтр асептически поместите мембранный фильтр на насыщенную абсорбирующую подложку лицевой стороной вверх.
8. Инкубируйте подложку с мембранным фильтром при 44,5 ± 0,2 °C в течение 22–24 ч.
9. После инкубации колонии E. coli на мембранном фильтре приобретают окраску от пурпурной до пурпурно-красной.

Приготовленную среду следует использовать в течение 24 ч после регидратации.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно действующим руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения метода

1. β-D-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E. coli, однако отдельные штаммы E. coli могут не продуцировать этот фермент и давать отрицательную реакцию.
2. Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост из-за различий в потребностях в питательных веществах.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет