HiMedia MCD1491-500G Соевый HiCynth бульон Раппапорта-Вассилиадиса

Селективная обогатительная питательная среда HiMedia MCD1491-500G Соевый HiCynth бульон Раппапорта—Вассилиадиса представляет собой химически определённый порошковый бульон с конечным pH 5,2 ± 0,2. Среда предназначена для обогащения и последующего выделения видов Salmonella из пищевых продуктов, кормов и фармацевтических образцов, однако может не поддерживать рост некоторых видов, включая S. Typhi.

Назначение

HiMedia MCD1491-500G применяется как селективная обогатительная среда для видов Salmonella при исследовании пищевых продуктов и кормов для животных. Согласно описанию принципа применения, среда также рекомендована для селективного обогащения Salmonella из фармацевтических продуктов и может использоваться для прямого обогащения образцов с низкой посевной дозой.

Состав

Состав на 1 л:

* Химически определённый пептон.
** Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Принцип действия и интерпретация

Соевый бульон Раппапорта—Вассилиадиса разработан на основе пересмотренной рецептуры Van Schothorst и соавторов и представляет собой модификацию обогатительного бульона Раппапорта—Вассилиадиса, описанного Van Schothorst и Renauld. Добавление хлорида магния в рецептуру основано на опубликованных данных Peterz и соавторов.

В соевом бульоне Раппапорта—Вассилиадиса HiCynth™ животные и растительные пептоны заменены химически определёнными пептонами, что позволяет исключить риски BSE/TSE, связанные с пептонами животного происхождения.

Селективность среды основана на физиологических свойствах Salmonella:

• Salmonella обычно сохраняет жизнеспособность при несколько повышенном осмотическом давлении;
• бактерии растут при несколько пониженном pH;
• Salmonella устойчивее к малахитовому зелёному по сравнению с другими бактериями.

Хлорид магния повышает осмотическое давление среды. Пептон HiCynth™ № 4 обеспечивает углеродистые и азотистые соединения, витамины и другие питательные вещества, необходимые для усиления роста Salmonella. Фосфатная система буферизует среду и поддерживает постоянный pH. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс. Малахитовый зелёный подавляет многие грамположительные бактерии и обеспечивает селективное обогащение Salmonella. Относительно низкая концентрация питательных веществ также способствует селективному обогащению Salmonella.

Методика может применяться для выделения Salmonella из человеческих фекалий без предварительного обогащения. Обогащённую культуру соевого бульона Раппапорта—Вассилиадиса HiCynth™ MCD1491 можно далее пересевать для выделения микроорганизмов на следующие среды:

• блестяще-зелёный агар HiCynth™ MCD016;
• дезоксихолат-цитратный агар HiCynth™ MCD065;
• ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар HiCynth™ MCD031.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 27,11 г сухой обезвоженной среды, что соответствует количеству среды на 1 л, в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду в пробирки или колбы в требуемом объёме.
4. Стерилизуйте автоклавированием при 115 °C в течение 15 мин. Указанный режим соответствует давлению 10 фунтов силы на квадратный дюйм.

Тип образцов

• Пищевые образцы.
• Корма для животных.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные действующими руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Среда содержит ингибирующие вещества и может не поддерживать рост некоторых видов Salmonella, например S. Typhi.
2. Среду необходимо использовать совместно с менее селективным обогатительным бульоном.
3. После этапа обогащения микроорганизмы необходимо выделять на менее селективных средах вместе с селективными средами.
4. Для подтверждения необходимо провести дополнительные биохимические и серологические исследования.

Рабочие характеристики и оценка

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или светло-синий однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Зеленовато-синяя прозрачная или слегка опалесцирующая среда с небольшим осадком.

Реакция среды

Реакция водного раствора с концентрацией 2,77 % масс./об. при 25 °C: pH 5,2 ± 0,2.

Диапазон pH

5,00–5,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивали после инкубации при 30–35 °C в течение 18–24 ч. Выделение проводили на ксилозо-лизин-дезоксихолатном агаре MCD031 после обогащения.

Смешанная культура: E. coli + S. Typhimurium.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

• Храните сухую среду в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
• Приготовленную среду храните при 15–30 °C.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия плотно закрывайте флакон и храните продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими методами лабораторной работы.

Сравнительное техническое отличие

В отличие от рецептур на основе животных и растительных пептонов, MCD1491 содержит химически определённый пептон Hi