Питательный микробиологический бульон HiMedia MCD1453-500G Быстрый HiColiform HiCynth бульон — порошкообразная химически определённая среда с хромогенным и флуорогенным субстратами. Среда предназначена для обнаружения и подтверждения Escherichia coli и общих колиформных бактерий в пробах воды; отдельные штаммы E. coli могут не давать положительной флуоресцентной реакции.

Назначение

Бульон рекомендован для обнаружения и подтверждения Escherichia coli и общих колиформных бактерий в пробах воды с использованием комбинации хромогенного и флуорогенного субстратов.

Типы образцов:

• пищевые продукты;
• вода.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Пептоны с химически определённым составом.

Принцип действия и интерпретация результатов

Быстрый бульон HiColiform™ HiCynth™ представляет собой модификацию бульона LMX, описанного Manafi и Kneifel. Среда применяется для обнаружения и подтверждения Escherichia coli и общих колиформных бактерий в пробах воды на основе хромогенного и флуорогенного субстратов.

Животные и растительные пептоны заменены синтетическими пептонами для исключения рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE), трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE) и генетически модифицированными организмами (ГМО).

Флуорогенный субстрат расщепляется ферментом β-D-глюкуронидазой, специфично присутствующим у Escherichia coli. Положительная реакция проявляется появлением синей флуоресценции при ультрафиолетовом освещении.

Присутствие общих колиформных бактерий определяется по сине-зелёному окрашиванию среды, возникающему вследствие расщепления хромогенного субстрата. IPTG усиливает синтез ферментов и повышает активность β-D-галактозидазы.

Для подтверждения присутствия E. coli на поверхность среды наносят реактив Ковача. При положительной реакции слой окрашивается в красный цвет в течение 2 мин.

Функции компонентов

• Пептон HiCynth™ № 1 служит источником углеродных и азотистых соединений, аминокислот с длинной цепью, витаминов и других необходимых для роста питательных веществ.
• Сорбитол является ферментируемым углеводом.
• Фосфатные соли обеспечивают буферное действие, необходимое для быстрого роста колиформных бактерий.
• Лаурилсульфат натрия придаёт среде селективность за счёт ингибирования сопутствующей микрофлоры, особенно грамположительных микроорганизмов.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 16,03 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Для приготовления бульона двойной концентрации используйте 32,06 г порошка на 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
3. При необходимости нагревайте суспензию до полного растворения среды.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (примерно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте и разлейте в необходимом объёме.

Требования к сбору и обращению с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения метода

97 % штаммов E. coli являются β-D-глюкуронидазоположительными, однако некоторые штаммы могут давать отрицательную флуоресцентную реакцию.

Контроль качества

Внешний вид

Кремовый или жёлтый однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Светло-жёлтый прозрачный раствор с небольшим осадком в пробирках.

Реакция среды

Реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 1,60 % при 25 °C: pH 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Ранее вид был известен как Enterobacter aerogenes.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

• Назначение изделия: бульон.
• Масса: 500 г.
• Условия хранения продукта: 15–25 °C в плотно закрытом контейнере.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Хранение и срок годности

Храните сухую среду при температуре 15–25 °C в плотно закрытом контейнере, а приготовленную среду — при 2–8 °C. Используйте продукт до истечения срока годности, указанного на этикетке.

После вскрытия бутылку необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию.

Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Условия применения и оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.