HiMedia MCD080-500G Лаурилсульфатный HiCynth бульон (лаурил-триптозный)

Сухая питательная среда HiMedia MCD080-500G Лаурилсульфатный HiCynth бульон (лаурил-триптозный) — порошковая среда с химически определённым пептоном HiCynth™ и лактозой. Среда предназначена для обнаружения колиформных бактерий в воде, сточных водах, молочных и других пищевых продуктах; аэробные спорообразующие микроорганизмы в среде подавляются.

Назначение

Лаурилсульфатный HiCynth™ бульон (лаурил-триптозный HiCynth™ бульон) применяют для обнаружения колиформных бактерий в:

• питьевой и другой воде;
• сточных водах и стоках;
• молочных продуктах;
• других пищевых образцах.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

* Пептон с химически определённым составом.

Принцип действия и интерпретация результатов

Колиформные бактерии относят к семейству Enterobacteriaceae. Эти микроорганизмы способны расти в присутствии желчных солей и образовывать кислоту и газ из лактозы в течение 48 ч при 37 °C. Колиформные бактерии также определяют как представителей Enterobacteriaceae, способных расти при 37 °C и обычно обладающих β-галактозидазой.

Лаурилсульфатный бульон применяют для обнаружения колиформных бактерий в воде, молочных продуктах и других пищевых продуктах в соответствии с методами APHA. Среда также используется для предварительного обнаружения колиформных бактерий в воде, стоках и канализационных водах методом наиболее вероятного числа (MPN). Лаурилсульфатный бульон разработан Mallmann и Darby. Добавление лаурилсульфата натрия делает среду селективной для колиформных бактерий.

Лаурилсульфатный бульон обеспечивает более высокий колиформный индекс по сравнению со стандартными средами подтверждающих методов. Образование газа в лаурилсульфатном бульоне служит не только предварительным, но и подтверждающим признаком присутствия колиформных бактерий при рутинном исследовании воды. Среда также рекомендована комитетом ISO для обнаружения колиформных бактерий.

В лаурилсульфатном HiCynth™ бульоне пептоны животного или растительного происхождения полностью заменены пептонами с химически определённым составом. Это исключает использование животных пептонов и связанные с ними риски губчатой энцефалопатии крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивной губчатой энцефалопатии (TSE).

Пептон HiCynth™ № 4 обеспечивает среду необходимыми компонентами для роста:

• соединениями азота и углерода;
• аминокислотами с длинной углеродной цепью;
• витаминами;
• сульфатами;
• микроэлементами.

Фосфаты калия образуют буферную систему, хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие, а лаурилсульфат натрия подавляет рост микроорганизмов, отличных от колиформных бактерий.

Методика приготовления и проведения анализа

1. Суспендируйте 35,6 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду в пробирки, содержащие перевёрнутые газоуловители Дарема.
4. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов (примерно 0,103 МПа или 1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Для посевной дозы 1 мл или менее используйте среду нормальной концентрации.
6. Для посевной дозы 10 мл или более приготовьте среду двойной концентрации либо пропорционально увеличьте концентрацию компонентов.
7. После инокуляции инкубируйте пробирки при 37 °C в течение 24–48 ч.
8. Из каждой пробирки, в которой наблюдается ферментация — первичная ферментация, — выполните пересев в две пробирки с лаурил-триптозным HiCynth™ бульоном.
9. Одну пробирку инкубируйте при 37 °C, вторую — при 44 °C.
10. Если в пробирке, инкубируемой при 44 °C, через 8–24 ч наблюдается ферментация, выполните индольный тест, добавив реактив Ковача.
11. Положительный индольный тест в пробирке с бульоном, где при 44 °C образовался газ, указывает на присутствие Escherichia coli.
12. Если в пробирке, инкубируемой при 37 °C, через 24 ч ферментация отсутствует, считают, что первичная ферментация была вызвана микроорганизмами, отличными от колиформных бактерий.

При хранении при 2–8 °C бульон может мутнеть; при комнатной температуре он становится прозрачным. Стандартные процедуры следует выполнять с учётом соответствующих методических источников APHA и ISO.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: светло-жёлтый прозрачный раствор без осадка.

Реакция и pH

Реакция: реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 3,56 % при 25 °C.

pH: 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч; код методики — M080.

| Организм | Посевная доза (КОЕ) | Рост | Образование газа | Образование индола при 44 °C | | --- | --- | --- | ---