HiMedia M941I-500G Модифицированный PSB бульон

Питательная микробиологическая среда HiMedia M941I-500G Модифицированный PSB бульон предназначена для первичного обогащения и количественного определения Yersinia enterocolitica в пищевых продуктах. Модифицированный PSB бульон используют при исследовании пищевых продуктов и кормов для животных; хранение сухой среды осуществляется при 10–30 °C в плотно закрытой таре.

Назначение

Модифицированный PSB бульон рекомендуется для первичного обогащения и количественного определения Yersinia enterocolitica из пищевых продуктов.

Состав и критерии эффективности соответствуют ISO 1994, ISO/DIS 10273:2017 и ISO 11133:2014 (E)/Amd.:2020.

Состав

M9411 — PSB бульон, модифицированный

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Пептон эквивалентен ферментативному гидролизату казеина.

Приготовление среды

1. Приготовьте суспензию 30,77 г сухой среды — эквивалентного количества обезвоженной среды на 1 л — в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Разлейте среду по пробиркам или колбам в необходимом объёме.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/кв. дюйм, что соответствует примерно 0,10 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.

Принцип действия и интерпретация

Yersinia enterocolitica широко распространена и часто выделяется из почвы, воды, животных и различных пищевых продуктов. Представители этого вида образуют биохимически неоднородную группу и способны расти при температурах холодильного хранения.

Основа PSB бульона рекомендована APHA для обогащения видов Yersinia. Модифицированный PSB бульон представляет собой модификацию PSB бульона M9411, рекомендованную комитетом ISO. Добавление сорбитола и желчных солей к фосфатному буферу, по данным методики, улучшает проведение холодового обогащения.

Функции компонентов:

• пептон обеспечивает питательные вещества, необходимые для роста;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие;
• фосфаты обеспечивают буферное действие среды;
• сорбитол служит источником энергии;
• желчные соли придают среде селективность в отношении видов Yersinia за счёт подавления сопутствующих грамположительных бактерий.

По сравнению с базовым PSB бульоном модифицированная формула содержит сорбитол и желчные соли для повышения селективности и пригодности к холодному обогащению.

Тип образца

• Материал: пищевые продукты и корма для животных.

Отбор и обработка образцов

Обогащение

1. Для приготовления первой исходной суспензии внесите образец в известный объём PSB бульона M9411, чтобы получить разведение 1/10 по массе/объёму или объёму/объёму.
2. Гомогенизируйте суспензию в перистальтическом гомогенизаторе в течение 2 мин.
3. Инкубируйте суспензию при 22–25 °C в течение 2–3 суток при перемешивании или в течение 5 суток без перемешивания.
4. Вторую исходную суспензию приготовьте аналогичным способом с использованием ITC бульона M1220, чтобы получить соотношение исследуемой порции к обогащающей среде 1/100 по массе/объёму или объёму/объёму.
5. Инкубируйте вторую суспензию при 25 °C в течение 48 ч.

Выделение

1. Выполните посев культуры, полученной из PSB культуры, на поверхность чашки с агаром CIN и инкубируйте при 30 °C в течение 24–48 ч.
2. Для щелочной обработки стерильной пипеткой перенесите 0,5 мл PSB культуры в 4,5 мл раствора KOH и перемешивайте только в течение 20 с. Немедленно выполните посев на чашку с агаром CIN. Инкубируйте при 30 °C в течение 24–48 ч.
3. С использованием ITC культуры выполните посев на поверхность чашки с агаром SSDC M1703. Инкубируйте при 30 °C в течение 24–48 ч.
4. Для очистки пересевайте отобранные колонии на поверхность питательного агара M561A. Инкубируйте при 30 °C в течение 24 ч.
5. Для подтверждения выполните посев штрихом на скошенную поверхность агара и инкубируйте при 30 °C в течение 24 ч. Чёрный ореол вокруг колоний указывает на положительную реакцию.

Контроль качества

Внешний вид

Цвет: от кремового до жёлтого.

Состояние: однородный, сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Светло-жёлтый прозрачный или слегка мутный раствор.

Реакция среды

Реакция водного раствора с концентрацией 3,08 % масса/объём при 25 °C.

• pH: 7,6 ± 0,2.

Диапазон pH

• pH: 7,40–7,80.

Культуральные характеристики

Продуктивность

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 25 ± 1 °C в течение 3–5 суток. Восстановление проводят на агаре SSDC M1703.

Селективность

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 25 ± 1 °C в течение 3–5 суток. Восстановление проводят на агаре SSDC M1703.