Элективная питательная среда Арабинозный бульон с этилвиолетом HiMedia M924 в порошковой форме с конечным pH 9,0 ± 0,2. Среда предназначена для обогащения видов Vibrio, при этом для дальнейшего выделения требуется высев обогащённого материала на селективную среду.

Назначение

Арабинозный бульон с этилвиолетом HiMedia M924 рекомендован для обогащения видов Vibrio.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с установленными параметрами эффективности.

Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту.

Принцип действия и интерпретация

Vibrio parahaemolyticus часто выделяется из прибрежных вод и морепродуктов в умеренных климатических зонах по всему миру. Клетки Vibrio parahaemolyticus нередко повреждаются в процессе обработки пищевых продуктов. Такие повреждённые клетки могут не восстанавливаться в полном объёме при высеве на селективные среды. Поэтому для оптимального восстановления как повреждённых, так и жизнеспособных клеток необходимо использовать специальные среды обогащения.

Арабинозный бульон с этилвиолетом Horie (HAE, pH 9,0) рекомендован для восстановления Vibrio parahaemolyticus из гомогенатов охлаждённых и замороженных устриц.

Пептон и пептон HM B являются источниками углерода, азота, витаминов и минеральных веществ. Хлорид натрия в концентрации 3,0 % защищает клетки, повреждённые воздействием низкой или высокой температуры, от инактивации. В результате ферментации арабинозы среда приобретает жёлтую окраску в кислых условиях. Бромтимоловый синий и этилвиолет выполняют функцию индикаторов pH.

Приготовление среды

1. Взвесьте 43,03 г порошка и суспендируйте в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте среду в пробирки или колбы в требуемом объёме.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно ≈0,10 МПа) при 121 °C в течение 15 мин.

Образцы

Типы образцов:

• клинические образцы: фекалии;
• пищевые образцы.

Отбор и обработка образцов

Пищевые образцы

1. Взвесьте 50 г образца морепродуктов и поместите в блендер.
2. Добавьте 450 мл фосфатно-солевого буферного разбавителя.
3. Гомогенизируйте образец в течение 1 мин при скорости 8000 об/мин. Полученная смесь соответствует разведению 1:10.
4. Приготовьте последующие разведения.
5. Для обогащения внесите материал в 10 мл арабинозного бульона с этилвиолетом Horie.
6. Инкубируйте пробирки в течение ночи при 35 °C.
7. Из пробирки с наибольшим разведением, в которой наблюдается рост, выполните посев петлёй из верхней части бульона на агар TCBS, артикул M189.

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом в соответствии с установленными методическими рекомендациями.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или зеленовато-синий однородный сыпучий порошок без комков.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Раствор синего цвета, прозрачный, без осадка.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

• Соответствующие номера WDCM.

Каждая серия среды проверяется на микроорганизмы, указанные в сертификате анализа (COA). При использовании среды для конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, пользователь должен самостоятельно подтвердить пригодность среды с учётом поставленной задачи.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытая ёмкость, сухое проветриваемое место, защита от экстремальных температур и источников воспламенения.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• После вскрытия храните продукт в сухом состоянии, плотно закрывая флакон.
• Продукт гигроскопичен; при попадании влаги возможно образование комков.
• Неправильное хранение может привести к комкованию порошка.
• После каждого использования плотно закрывайте ёмкость.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Эффективность среды обеспечивается при применении в течение установленного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными методическими рекомендациями.
• При необходимости обращайтесь к руководствам по безопасности, приведённым в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковую интенсивность и характер роста на среде.
2. Каждая серия среды проверяется на микроорганизмы, указанные в сертификате анализа. При необходимости определения другого микроорганизма пользователь должен валидировать среду с учётом конкретной задачи. После обогащения в бульоне требуется дальнейшее восстановление и выделение культуры на селективной среде.
3. Биохимическую характеристику проводят на чистых изолятах для полной идентификации микроорганизма.

Оценка эффективности

Ожидаемые характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах установленного срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов среды посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материал, контактировавший с клиническим образцом, должен быть обеззаражен и утилизирован в соответствии с действующими лабораторными методиками.