HiMedia M924-500G Арабинозо-этилвиолетовый бульон Хори

Питательная среда HiMedia M924-500G Арабинозо-этилвиолетовый бульон Хори — сухой порошковый бульон с конечным pH 9,0 ± 0,2. Среда предназначена для обогащения видов Vibrio, включая восстановление повреждённых клеток Vibrio parahaemolyticus в пищевых и клинических образцах, и требует применения селективной среды для последующего выделения.

Назначение

Арабинозо-этилвиолетовый бульон Хори предназначен для обогащения видов Vibrio. Среда применяется при исследовании клинических образцов — фекалий — и пищевых образцов, включая морепродукты.

Среда Horie Arabinose Ethyl Violet Broth (HAE, pH 9,0) рекомендована для восстановления Vibrio parahaemolyticus из гомогенатов охлаждённых и замороженных устриц. Клетки Vibrio parahaemolyticus часто повреждаются при переработке пищевых продуктов и могут не восстанавливаться полностью при высеве на селективные среды, поэтому для оптимального восстановления повреждённых и неповреждённых клеток требуется этап обогащения.

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик. HM peptone B эквивалентен мясному экстракту.

Принцип действия и интерпретация

Пептон и HM peptone B являются источниками углерода, азота, витаминов и минеральных веществ. Хлорид натрия в концентрации 3,0 % защищает клетки, повреждённые холодом или нагреванием, от инактивации.

При ферментации арабинозы среда подкисляется и приобретает жёлтую окраску. Бромтимоловый синий и этиловый фиолетовый выполняют функцию индикаторов pH.

Приготовление среды

1. Взвесить 43,03 г сухой среды и суспендировать в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть для полного растворения среды.
3. Разлить приготовленную среду в пробирки или колбы в необходимом объёме.
4. Стерилизовать в автоклаве при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.

Пробоподготовка и проведение анализа

Пищевые образцы

1. Поместить 50 г образца морепродуктов в блендер.
2. Добавить 450 мл фосфатно-солевого разбавителя.
3. Гомогенизировать в течение 1 мин при скорости 8000 об/мин. Полученная смесь представляет собой разведение 1:10.
4. Приготовить последующие разведения.
5. Засеять по 10 мл среды Horie Arabinose Ethyl Violet Broth для этапа обогащения.
6. Инкубировать пробирки в течение ночи при 35 °C.
7. Из пробирки с наибольшим разведением, в которой наблюдается рост, выполнить посев петлёй из верхней части бульона на агар с тиосульфатом, цитратом, жёлчными солями и сахарозой (TCBS Agar, M189).

Клинические образцы

При работе с клиническими образцами следует применять соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным методикам.

Типы образцов

• Клинические образцы: фекалии.
• Пищевые образцы.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или зеленовато-синий однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Раствор синего цвета, прозрачный, без осадка.

Реакция среды

Реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 4,3 % при 25 °C.

• pH: 9,0 ± 0,2.

Диапазон pH

• pH: 8,80–9,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

Хранить продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости. Приготовленную среду хранить при температуре 2–8 °C. Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности продукта. Неправильное хранение может привести к комкованию. Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывать ёмкость. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Ограничения применения

1. Отдельные микроорганизмы имеют разные требования к условиям роста и могут демонстрировать на среде различную интенсивность роста.
2. Каждая партия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). При необходимости применения среды для микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа, пользователь должен самостоятельно валидировать среду с учётом конкретных требований. После обогащения в данном бульоне требуется дальнейший высев на селективную среду.
3. Биохимическую характеристику проводят на чистых изолятах для полной идентификации.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно указаниям на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных температурных условиях.

Меры безопасности

• Продукт предназначен для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитать этикетку.
• При работе с образцами и культурами использовать защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать правила надлежащей практики микробиологической лаборатории при работе с образцами и культурами.
• При обращении с клиническими образцами соблюдать стандартные меры предосторожности согласно установленным методикам.
• Дополнительные требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов путём автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материал, контактировавший с клиническими образцами, должен быть обеззаражен и утилизирован в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Техническое отличие методики

В отличие от непосредственного высева на селективную среду, методика с Horie Arabinose Ethyl Violet Broth включает предварительное обогащение, необходимое для восстановления клеток Vibrio parahaemolyticus, повреждённых охлаждением, замораживанием или технологической обработкой.