Маннозный бульон HiMedia M846-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда Маннозный бульон HiMedia M846-500G (уп/500 гр) — порошковый бульон для ускоренного обогащения культур. Маннозный бульон HiMedia M846-500G применяют для определения сальмонелл в пищевых продуктах и кормах с последующим серологическим тестированием.

Назначение

Маннозный бульон M-Broth используют для обнаружения сальмонелл в образцах пищевых продуктов и кормов методом ускоренного обогащения с последующим серотипированием.

• Тип питательной среды: диагностическая
• Назначение изделия: бульон
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Тип образца: пищевые продукты и корма

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Сальмонеллы — факультативно-анаэробные грамотрицательные палочки, обычно оксидазоотрицательные, лактозоотрицательные, образующие H₂S и газ. Сальмонеллы распространены в окружающей среде и присутствуют в кишечном тракте многих диких и домашних животных.

Виды Salmonella вызывают различные заболевания человека, объединяемые термином «сальмонеллёз», включая диарейные заболевания и бактериемические состояния, приводящие к кишечной лихорадке. Тяжесть диарейных заболеваний зависит от вирулентности штамма и состояния организма человека. Серологические процедуры, подтверждающие идентификацию микроорганизма, обычно основаны на реакциях агглютинации.

Маннозный бульон разработан Sperber и Diebel для ускорения обнаружения сальмонелл. Ускоренная 50-часовая процедура обнаружения включает:

1. Предварительное обогащение в течение 18 ч.
2. Селективное обогащение в течение 24 ч.
3. Дополнительное селективное обогащение в течение 6–8 ч.
4. Серологическое исследование в течение 2 ч.

На этапе селективного обогащения для предотвращения неспецифической агглютинации из бульона APT удаляют декстрозу и добавляют маннозу. Метод обогащения с последующим серологическим исследованием позволяет проводить анализ быстрее и с меньшей сложностью по сравнению с методом, описанным в Бактериологическом аналитическом руководстве, при сохранении точности и чувствительности метода.

Маннозный бульон также соответствует рекомендациям Американской ассоциации общественного здравоохранения (APHA) по выделению и идентификации сальмонелл пищевого происхождения. Среда содержит питательные вещества, необходимые для интенсивного роста сальмонелл и развития жгутиков.

Функции компонентов среды:

• Триптон и дрожжевой экстракт обеспечивают органический азот, углерод, серу, витамины и микроэлементы, необходимые для роста видов Salmonella.
• Манноза является сбраживаемым сахаром и источником энергии, а также предотвращает агглютинацию фимбрий сальмонелл.
• Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.
• Дикалий гидрофосфат выполняет функцию буфера.
• Неорганические соли стимулируют рост бактерий.
• Полисорбат 80 обеспечивает среду жирными кислотами.

Методика проведения анализа

1. Приготовьте 10%-ную суспензию образца в стерильном лактозном бульоне M026.
2. Инкубируйте суспензию при 35 ± 2 °C в течение 18–24 ч.
3. Перенесите 1 мл предварительно обогащённой культуры в 9 мл селенит-цистинового бульона M025 и 9 мл тетратионатного бульона M032.
4. Инкубируйте полученные обогащённые культуры при 35 ± 2 °C в течение 24 ч.
5. Пересев осуществляйте в маннозный бульон M-Broth.
6. Инкубируйте посевы при 35 ± 2 °C в течение 6–8 ч.
7. После инкубации выполните H-агглютинационный тест в соответствии со стандартными процедурами.

Приготовление среды

1. Взвесьте 36,23 г порошка и суспендируйте в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду в пробирки или колбы в требуемом объёме.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C и давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,10 МПа) в течение 15 мин.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность: прозрачный или слегка опалесцирующий раствор светло-янтарного цвета с небольшим количеством осадка.

Реакция среды

Реакция: для водного раствора концентрацией 3,62 % масса/объём при 25 °C.

• pH: 7,0 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,80–7,20

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 6–8 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

Для полной идентификации требуется дополнительное биохимическое исследование.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения сухой среды: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Условия после вскрытия: хранить в сухом виде, плотно закрывая флакон.
• Требования к помещению: сухое, вентилируемое место, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.

Продукт обладает гигроскопичностью. При неправильном хранении или недостаточно плотном закрытии флакона возможно образование комков. Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Требования безопасности

Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку.