HiMedia M846-100G M-бульон

Питательная микробиологическая среда HiMedia M846-100G M-бульон — сухая порошкообразная среда для ускоренного серологического выявления Salmonella в пищевых продуктах и кормах. Среду применяют для последовательного обогащения образцов перед реакцией агглютинации; температура хранения продукта составляет 10–30 °C.

Назначение

M-бульон предназначен для выявления Salmonella в образцах пищевых продуктов и кормов методом ускоренного обогащения с последующим серологическим исследованием.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Принцип действия и интерпретация

Salmonella — факультативно-анаэробные грамотрицательные палочки, обычно оксидазоотрицательные и лактозоотрицательные; образуют H₂S и газ. Бактерии рода Salmonella широко распространены в окружающей среде и встречаются в кишечном тракте многих диких и домашних животных.

Виды Salmonella вызывают различные заболевания человека, объединяемые названием «сальмонеллёз», включая диарейные заболевания и бактериемические состояния, приводящие к кишечной лихорадке. Тяжесть диарейных заболеваний зависит от вирулентности штамма и состояния организма человека.

Серологические процедуры подтверждения идентификации микроорганизма обычно основаны на реакциях агглютинации.

M-бульон разработан для ускорения выявления Salmonella. Ускоренная 50-часовая процедура выявления включает:

1. Предварительное обогащение в течение 18 ч.
2. Селективное обогащение в течение 24 ч.
3. Дополнительное селективное обогащение в течение 6–8 ч.
4. Серологическое исследование в течение 2 ч.

На этапе селективного обогащения для предотвращения неспецифической агглютинации из основы APT-бульона удаляют декстрозу и добавляют маннозу. Метод обогащения с последующим серологическим исследованием позволяет сократить продолжительность анализа при сохранении точности и чувствительности метода.

M-бульон содержит питательные компоненты, необходимые для интенсивного роста Salmonella и развития жгутиков.

Функции компонентов среды:

• триптон и дрожжевой экстракт обеспечивают органический азот, углерод, серу, витамины и микроэлементы, необходимые для роста видов Salmonella;
• манноза является сбраживаемым сахаром и источником энергии, а также предотвращает агглютинацию фимбрий Salmonella;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие;
• дикалий гидрофосфат выполняет функцию буфера;
• неорганические соли стимулируют рост бактерий;
• полисорбат 80 обеспечивает поступление жирных кислот.

Методика подготовки и проведения анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 36,23 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду в пробирки или колбы в требуемом объёме.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин и давлении 15 фунтов (примерно 0,103 МПа).

Подготовка образца и ускоренное обогащение

1. Приготовьте 10%-ную суспензию образца в стерильном лактозном бульоне M026.
2. Инкубируйте суспензию при 35 ± 2 °C в течение 18–24 ч.
3. Перенесите 1 мл предварительно обогащённой культуры в 9 мл селенит-цистинового бульона M025 и в 9 мл тетратионатного бульона M032.
4. Инкубируйте культуры при 35 ± 2 °C в течение 24 ч.
5. Полученную обогащённую культуру внесите в M-бульон.
6. Инкубируйте M-бульон при 35 ± 2 °C в течение 6–8 ч.
7. После инкубации выполните H-агглютинацию согласно стандартной процедуре.

Тип образца

• Образцы пищевых продуктов.
• Образцы кормов.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные применимыми руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Для полной идентификации микроорганизма требуется проведение дополнительных биохимических исследований.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке и в пределах установленного срока годности, если среда хранится при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Кремовый или жёлтый однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный или слегка опалесцирующий раствор светло-янтарного цвета с небольшим осадком.

Реакция среды

Реакция 3,62%-ного водного раствора массой к объёму при 25 °C: pH 7,0 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 6–8 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения сухой среды: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывать контейнер