Лизиновый железосодержащий бульон с цистином HiMedia M845-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда Лизиновый железосодержащий бульон с цистином HiMedia M845-500G (уп/500 гр) для быстрого предварительного определения сальмонелл в пищевых продуктах, ингредиентах и кормах. Применяется для сокращения времени выдержки проб; сертификат ФСЗ 2009/03705.

Принцип измерения

Лизиновый железосодержащий бульон с цистином является модификацией формулы Хобена, Эштона и Петерсона. Триптон и L-цистин обеспечивают содержание углеродных и азотистых соединений, а экстракт дрожжей поставляет витамины комплекса B. Декстроза, маннит и салицин выступают в роли ферментируемых углеводов.

Индикация основана на следующих реакциях:

• Образование сероводорода (H₂S): цитрат аммония железа(III) и тиосульфат натрия служат индикаторами; культуры, продуцирующие H₂S, вызывают почернение среды из-за образования сульфида железа.
• Декарбоксилирование лизина: приводит к щелочной реакции (фиолетовый цвет) с образованием амина кадаверина.
• Отсутствие декарбоксилирования лизина: приводит к образованию кислого столбика (жёлтый цвет).
• Дезаминирование лизина: приводит к образованию α-кетокарбоновой кислоты, которая под воздействием кислорода реагирует с солью железа у поверхности среды, образуя красно-коричневое соединение.

Методика проведения анализа

Пробоподготовка и посев

1. Среду готовят в виде скошенных пробирок (посев осуществляется путем прокалывания до основания столбика и инокуляции скоса).
2. 25 г исследуемого образца добавляют в лактозный бульон (M026), перемешивают и инкубируют при 35 ± 2 °C в течение 24 часов.
3. 1 мл полученной обогащенной культуры переносят в 10 мл тетратионатного бульона (M032) и инкубируют при 35 ± 2 °C в течение 24 часов.
4. 1 мл из вторичной культуры переносят в 10 мл лизинового железосодержащего бульона с новобиоцином и инкубируют при 35 ± 2 °C в течение 24 часов.
5. Для исключения возможности пропуска не-H₂S-продуцирующих штаммов Salmonella инкубацию продлевают ещё на 16–24 часа.

Интерпретация результатов

В каждую пробирку добавляют 0,1 мл раствора бромтимолового синего (0,3 %) в 0,1 N NaOH и 50 % этаноле. Изменение цвета с жёлтого на тёмно-зелёный или синий указывает на щелочную реакцию и наличие видов Salmonella.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

Приготовление и стерилизация

1. Растворить 25,7 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть до полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до комнатной температуры.
5. Асептически добавить одну ампулу реконструированной селективной добавки новобиоцина (FD101).
6. Тщательно перемешать перед разливом в стерильные пробирки или колбы.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при использовании селективной добавки новобиоцина (FD101) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

* — после добавления бромтимолового синего.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать бутыль во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Утилизация: использованные или непригодные препараты подлежат безопасному удалению путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.

Комплект поставки и совместимость

По заявке поставляется:

• FD101 Novobiocin Selective Supplement / Новобиоциновая селективная добавка