Эскулиновый бульон с азидом и канамицином HiMedia M776-100G (уп/100 гр)

Диагностическая питательная среда Эскулиновый бульон с азидом и канамицином HiMedia M776-100G (уп/100 гр) производства HiMedia. Рекомендуется для селективного выделения и идентификации стрептококков группы D (энтерококков) в пищевых продуктах.

Область применения

Среда используется для обнаружения энтерококков в образцах пищевых материалов, особенно имеющих животное происхождение. Применяется в рамках бактериологического мониторинга пищевой продукции, в том числе при использовании метода погружных планшетов (dip slide technique).

Принцип измерения и интерпретация

Энтерококки (фекальные стрептококки с антигенами группы D по Лансфилду) являются частью автохтонной микрофлоры человека и животных и выступают в качестве контаминантов пищевых продуктов.

Принцип работы среды основан на следующем:

• Питательная основа: триптон и дрожжевой экстракт обеспечивают необходимые питательные вещества для роста энтерококков.
• Селективность: сульфат канамицина и азид натрия выступают в роли ингибиторов, подавляющих рост нецелевой микрофлоры.
• Индикация: эскулин и цитрат аммония-железа(III) образуют индикаторную систему. Стрептококки, гидролизующие эскулин, приводят к образованию чёрных зон вокруг колоний. Чёрный цвет обусловлен образованием железистых фенольных соединений из продуктов гидролиза эскулина и ионов двухвалентного железа.

Поскольку не существует универсальной среды, способной изолировать все штаммы энтерококков, предварительный подсчёт должен быть подтверждён дополнительными тестами.

Состав

Состав, г/л:

Методика проведения анализа

Подготовка образца

1. 1 г или 1 мл гомогенизированного пищевого продукта добавляют к 9 мл предварительно охлаждённого разбавителя (триптонная вода, M463).
2. Готовят десятикратные разведения.

Посев и инкубация

1. Десятикратные разведения инокулируют в эскулиновый бульон с азидом и канамицином.
2. Инкубируют при температуре 35–37 °C в течение 16–24 часов.
3. При появлении почернения среды проводят пересев на агар (M510) для последующих подтверждающих тестов.

Приготовление и стерилизация

1. Растворить 32,67 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть для полного растворения компонентов.
3. Разлить по пробиркам или колбам.
4. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.

Технические характеристики

• Тип среды: диагностическая, селективная.
• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до жёлтого цвета с зеленоватым оттенком.
• Цвет и прозрачность готовой среды: янтарный цвет, прозрачный раствор.
• Реакция (pH 3,27% водного раствора при 25 °C): 7,0 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,80–7,20.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать бутылку во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 15–25 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Меры предосторожности и утилизация

• Безопасность: использовать защитные перчатки, спецодежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдать правила работы в микробиологических лабораториях.
• Утилизация: использованные или непригодные препараты подлежат безопасному удалению путём автоклавирования и/или сжигания в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.

Ограничения

Для полной идентификации штаммов необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.