HiMedia M689-500G Декарбоксилазный бульон Мёллера с аргинином

Сухая питательная среда HiMedia M689-500G Декарбоксилазный бульон Мёллера с аргинином для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать гидрохлорид L-аргинина. Применяется для идентификации грамотрицательных энтеробактерий; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения

Декарбоксилазный бульон Мёллера с гидрохлоридом аргинина используется для дифференциации грамотрицательных энтеробактерий на основе их способности декарбоксилировать L-аргинин.

В состав среды входят пептон и HM-пептон B, обеспечивающие азотистые питательные вещества для роста бактерий. Декстроза служит ферментируемым углеводом, а пиридоксаль выступает в роли кофактора фермента декарбоксилазы. В качестве индикаторов pH используются бромкрезоловый пурпурный и крезоловый красный.

При инокуляции бактериями, ферментирующими декстрозу, pH среды снижается из-за образования кислоты, что меняет цвет индикатора с пурпурного на жёлтый. Образовавшаяся кислота стимулирует фермент декарбоксилазы. Аргинин сначала гидролизуется до орнитина, который затем декарбоксилируется с образованием путресцина. Образование амина путресцина повышает pH среды, возвращая цвет индикатора от жёлтого к пурпурному. Если микроорганизмы не вырабатывают соответствующий фермент, среда остаётся кислой и жёлтой.

Методика проведения анализа

1. Подготовка среды: суспендируйте 20,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды. При необходимости нагрейте для полного растворения.
2. Разлив: распределите по 5 мл среды в пробирки с завинчивающимися крышками.
3. Стерилизация: автоклавируйте при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа / 15 psi) в течение 10 минут.
4. Охлаждение: охладите пробирки в вертикальном положении.
5. Инокуляция: внесите исследуемый микроорганизм в пробирку.
6. Герметизация: накройте поверхность среды слоем стерильного минерального масла (2–3 мл) для защиты от воздуха. Воздействие воздуха может вызвать защелачивание поверхности, что сделает тест недостоверным.
7. Инкубация: выдержите при температуре 35–37 °C до 4 суток.
8. Интерпретация: перед оценкой результатов осторожно встряхните пробирку. В результате теста могут наблюдаться два слоя разного цвета (жёлтый и пурпурный).

Для контроля каждый изолят должен быть также инокулирован в пробирку с базовой средой, не содержащей аминокислоты.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 6,0 ± 0,2
• Внешний вид: светло-жёлтый или зеленовато-жёлтый однородный свободный порошок
• Цвет и прозрачность готовой среды: пурпурный прозрачный раствор без осадка
• Диапазон pH: 5,80–6,20

Дополнительные параметры

Культуральные характеристики

Результаты наблюдаются после инкубации при 35–37 °C до 4 суток (пробирки закрыты стерильным минеральным маслом).

Область применения

Среда предназначена для работы с изолированными микроорганизмами из клинических и неклинических образцов. Используется в микробиологических лабораториях для идентификации бактерий.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 15–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

• Использование: только для профессионального использования In Vitro.
• Требования к безопасности: использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица. Соблюдать стандартные правила микробиологической работы с культурами.
• Утилизация: загрязнённые материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией или подвергнуты сжиганию в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.