Декарбоксилазный бульон Мэллера (с аргинином) HiMedia M689-100G (уп/100 гр)

Дифференциальная питательная среда Декарбоксилазный бульон Мэллера (с аргинином) HiMedia M689-100G (уп/100 гр) — порошковая среда для определения декарбоксилирования L-аргинина. Среда предназначена для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать гидрохлорид L-аргинина; результат оценивают по изменению окраски индикаторов pH.

Назначение

Декарбоксилазный бульон Мэллера с гидрохлоридом L-аргинина предназначен для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать гидрохлорид L-аргинина, включая грамотрицательные кишечные бациллы.

Тип образца: выделенный микроорганизм из клинических и неклинических образцов.

Тип питательной среды: дифференциальная.

Назначение изделия: бульон.

Применение: диагностика in vitro, только для профессионального использования.

Сертификат: ФСЗ 2009/03705.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих параметров.

Эквивалент мясного экстракта: пептон HM B.

Конечный pH при 25 °C: 6,0 ± 0,2.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид: однородный, сыпучий порошок от светло-жёлтого до зеленовато-жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор фиолетового цвета, без осадка.

Реакция: реакция водного раствора концентрацией 2,05 % масс./об. при 25 °C.

pH: 5,80–6,20.

Принцип действия и интерпретация

Декарбоксилазный бульон Мэллера с гидрохлоридом L-аргинина используется для дифференциации грамотрицательных кишечных бацилл по способности декарбоксилировать гидрохлорид L-аргинина. Декарбоксилазный бульон был введён Мэллером для выявления продукции лизиндекарбоксилазы, орнитиндекарбоксилазы и аргининдегидролазы. Ранее бактериальные декарбоксилазы аминокислот изучались Гейлом и Гейлом совместно с Эппсом. Декарбоксилазные среды также рекомендуются стандартными методами идентификации бактерий.

Пептон HM B и пептон обеспечивают бактерии азотистыми питательными веществами. Декстроза является ферментируемым углеводом, а пиридоксаль — кофактором фермента декарбоксилазы. Бромкрезоловый пурпурный и крезоловый красный выполняют функцию индикаторов pH.

При внесении в среду бактерий, ферментирующих декстрозу, образуются кислоты, pH снижается, а цвет индикатора изменяется с фиолетового на жёлтый. Кислая реакция стимулирует фермент декарбоксилазу. Аргинин сначала гидролизуется до орнитина, который затем декарбоксилируется с образованием путресцина. Образование амина путресцина повышает pH среды и изменяет цвет индикатора с жёлтого на фиолетовый.

Если микроорганизм не продуцирует соответствующий фермент, среда остаётся кислой и приобретает жёлтую окраску. Каждый исследуемый изолят также следует инокулировать в пробирку с базальной средой без аминокислоты. После инкубации при проведении декарбоксилазного теста в пробирке могут наблюдаться два слоя разного цвета — жёлтый и фиолетовый. Перед интерпретацией результата пробирку следует осторожно встряхнуть.

Инокулированные пробирки необходимо защищать от контакта с воздухом слоем стерильного минерального масла. Воздействие воздуха может вызвать ощелачивание поверхности среды, что делает результат теста недействительным.

Методика приготовления и проведения анализа

1. Взвесьте 20,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте смесь для полного растворения среды.
3. Разлейте по 5 мл в пробирки с завинчивающимися крышками.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C в течение 10 мин и давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа).
5. Охладите среду в пробирках, установив их в вертикальном положении.
6. Инокулируйте пробирки исследуемым материалом.
7. Нанесите поверх среды 2–3 мл стерильного минерального масла для защиты от контакта с воздухом.
8. Инкубируйте инокулированные пробирки до 4 суток при 35–37 °C.
9. Перед интерпретацией результата осторожно встряхните пробирку.

Для каждого изолята дополнительно используйте пробирку с базальной средой, не содержащей аминокислоту.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение до 4 суток; инокулированные пробирки покрывают стерильным минеральным маслом.