Декарбоксилазный бульон Мэллера (с аргинином) HiMedia M689-100G (уп/100 гр)

Дифференциальная питательная среда Декарбоксилазный бульон Мэллера (с аргинином) HiMedia M689-100G. Применяется для дифференциации бактерий на основании их способности декарбоксилировать L-аргинина гидрохлорид.

Принцип измерения и интерпретация

Среда используется для дифференциации грамотрицательных энтеробактерий по способности декарбоксилировать L-аргинина гидрохлорид.

В состав входят пептон и HM-пептон B, обеспечивающие азотистые питательные вещества для роста бактерий. Декстроза служит ферментируемым углеводом, а пиридоксаль является кофактором фермента декарбоксилазы. В качестве индикаторов pH используются бромкрезоловый пурпурный и крезоловый красный.

При инокуляции бактериями, ферментирующими декстрозу, происходит снижение pH из-за образования кислоты, что меняет цвет индикатора с пурпурного на жёлтый. Образовавшаяся кислота стимулирует фермент декарбоксилазы. Аргинин сначала гидролизуется до орнитина, который затем декарбоксилируется с образованием путресцина. Образование амина путресцина повышает pH среды, возвращая цвет индикатора из жёлтого в пурпурный. Если организмы не вырабатывают соответствующий фермент, среда остаётся кислой (жёлтого цвета).

Для контроля каждый исследуемый изолят должен быть также инокулирован в базовую среду без добавления аминокислоты. После инкубации в тесте на декарбоксилазу могут наблюдаться два слоя разных цветов (жёлтый и пурпурный); перед интерпретацией результатов пробирку следует осторожно встряхнуть.

Методика проведения анализа

1. Приготовление среды: суспендировать 20,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды. При необходимости нагреть до полного растворения.
2. Розлив: распределить по 5 мл среды в пробирки с завинчивающимися крышками.
3. Стерилизация: автоклавировать при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 10 минут.
4. Охлаждение: охлаждать пробирки в вертикальном положении.
5. Инокуляция: внести исследуемый микроорганизм в пробирку.
6. Изоляция: покрыть поверхность среды слоем стерильного минерального масла (2–3 мл).

Важное ограничение: инокулированные пробирки обязательно должны быть защищены от воздуха слоем стерильного минерального масла. Контакт с воздухом может вызвать защелачивание поверхности среды, что делает результат теста недостоверным.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 6,0 $\pm$ 0,2
• Внешний вид порошка: светло-жёлтый или зеленовато-жёлтый гомогенный свободнотекучий порошок
• Цвет и прозрачность готовой среды: пурпурный прозрачный раствор без осадка
• Диапазон pH: 5,80–6,20

Дополнительные параметры

Культуральные характеристики

Результаты наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение до 4 суток (пробирки с минеральным маслом).

Область применения и требования

• Тип образцов: изолированные микроорганизмы из клинических и неклинических проб.
• Назначение: диагностика in vitro, только для профессионального использования.
• Меры предосторожности: при работе с образцами и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности, использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Утилизация: контаминированные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией или подвергнуты инсинерации.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре +10…+30 °C в сухом вентилируемом месте, защищённом от перепадов температур и источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре +15…+30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть во избежание образования комков.