Декарбоксилазный бульон Мэллера (с орнитином) HiMedia M688-100G (уп/100 гр)

Дифференциальная питательная среда Декарбоксилазный бульон Мэллера (с орнитином) HiMedia M688-100G (уп/100 гр) для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать L-орнитин. Среда предназначена для идентификации грамотрицательных энтеробактерий, содержит гидрохлорид L-орнитина и имеет конечный pH 6,0 ± 0,2 при 25 °C.

Назначение

Декарбоксилазный бульон Мэллера с гидрохлоридом L-орнитина предназначен для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать L-орнитин. Среда применяется для исследования изолированных микроорганизмов, выделенных из клинических и внеклинических образцов.

Среда используется для дифференциации грамотрицательных кишечных палочек и других энтеробактерий. Продукция орнитиндекарбоксилазы служит дополнительным признаком при дифференциации видов Klebsiella и Enterobacter: Klebsiella неподвижны и не продуцируют орнитиндекарбоксилазу, тогда как Enterobacter подвижны и продуцируют орнитиндекарбоксилазу, за исключением Enterobacter agglomerans.

Состав

Состав среды

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих параметров. HM-пептон B эквивалентен экстракту говядины.

Принцип действия и интерпретация

Декарбоксилазный бульон Мэллера с гидрохлоридом орнитина выявляет способность микроорганизмов декарбоксилировать L-орнитин. Декарбоксилазный бульон был введён Мэллером для выявления продукции лизиндекарбоксилазы, орнитиндекарбоксилазы и аргининдегидролазы. Декарбоксилазы аминокислот ранее исследовались Gale, а также Gale и Epps.

В состав среды входят:

• HM-пептон B и пептон — источники азотистых питательных веществ для роста бактерий;
• декстроза — ферментируемый углевод;
• пиридоксаль — кофактор фермента декарбоксилазы;
• бромкрезоловый пурпурный и крезоловый красный — индикаторы pH.

При внесении микроорганизма, ферментирующего декстрозу, образуются кислоты, pH среды снижается, а цвет индикатора изменяется с пурпурного на жёлтый. Кислая реакция стимулирует активность фермента декарбоксилазы. При декарбоксилировании орнитина образуется путресцин. Формирование амина путресцина повышает pH среды, в результате чего цвет индикатора изменяется с жёлтого на пурпурный.

Если микроорганизм не продуцирует соответствующий фермент, среда остаётся кислой и приобретает жёлтый цвет. Каждый исследуемый изолят также следует инокулировать в пробирку с базовой средой без аминокислоты. После инкубации в декарбоксилазном тесте могут наблюдаться два слоя различного цвета — жёлтый и пурпурный. Перед интерпретацией результатов пробирку необходимо осторожно встряхнуть.

Методика приготовления и проведения анализа

1. Суспендируйте 20,52 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте среду порциями по 5 мл в пробирки с завинчивающимися крышками.
4. Стерилизуйте пробирки автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа, ≈1,03 бар) при 121 °C в течение 10 мин.
5. Охладите пробирки в вертикальном положении.
6. Инокулируйте пробирки исследуемым материалом.
7. Налейте поверх среды 2–3 мл стерильного минерального масла, чтобы защитить инокулированные пробирки от контакта с воздухом.
8. После инкубации осторожно встряхните пробирку и оцените изменение цвета среды.

Тип образца

Исследуемый материал: изолированный микроорганизм из клинических и неклинических образцов.

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным лабораторным руководствам и процедурам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

Инокулированные пробирки необходимо защищать от воздуха слоем стерильного минерального масла. Воздействие воздуха может вызвать ощелачивание поверхности среды, что делает результат теста недействительным.

Контроль качества

Внешний вид сухой среды

Внешний вид: однородный, легкосыпучий порошок от светло-жёлтого до зеленовато-жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность: прозрачный раствор пурпурного цвета без осадка.

Реакция и pH

Реакция: водный раствор с концентрацией 2,05 % масс./об. при 25 °C.

pH: 6,0 ± 0,2.

Диапазон pH: 5,80–6,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение не более 4 суток. Инокулированные пробирки должны быть покрыты стерильным минеральным маслом.

* Соответствующие номера WDCM.

Proteus hauseri ранее классифицировался как Proteus vulgaris.

Pseudomonas paraeruginosa ранее классифицировался как Pseudomonas aeruginosa.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M688-100G
• Форма выпуска: упаковка 100 г
• Тип питательной среды: дифференциальная
• Назначение изделия: бульон
• Назначение: дифференциация бактерий по способности декарбоксилировать L-орнитин