Дифференциальная питательная среда Декарбоксилазный бульон Мэллера HiMedia M687-100G (уп/100 гр) производства HiMedia предназначена для определения декарбоксилазной активности бактерий в отношении L-лизина. Декарбоксилазный бульон применяется для дифференциации выделенных микроорганизмов, причём анализ проводят только с чистой культурой, а не со смешанным посевом.

Назначение

Декарбоксилазный бульон Мэллера с гидрохлоридом L-лизина предназначен для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать гидрохлорид L-лизина. Продукт используется для исследования изолированных микроорганизмов, выделенных из клинических и неклинических образцов.

• Тип питательной среды: дифференциальная
• Назначение изделия: бульон
• Форма выпуска: порошок
• Масса упаковки: 100 г
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705
• Происхождение: животное

Состав

Состав рассчитан на приготовление 1 л среды.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик. Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту.

• Конечный pH при 25 °C: 6,0 ± 0,2

Принцип измерения и интерпретация

Многие виды бактерий обладают ферментами, способными декарбоксилировать определённые аминокислоты в исследуемой среде с образованием щелочных аминов и углекислого газа в качестве побочных продуктов.

Декарбоксилазную активность представителей семейства Enterobacteriaceae обычно определяют с использованием декарбоксилазного бульона Мэллера. Среда разработана для выявления образования лизиндекарбоксилазы, орнитиндекарбоксилазы и аргининдегидролазы.

Декарбоксилазный бульон Мэллера с гидрохлоридом L-лизина используется для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать гидрохлорид лизина. Компоненты среды выполняют следующие функции:

• пептон и пептон HM B обеспечивают бактерии азотистыми питательными веществами;
• декстроза является сбраживаемым углеводом;
• пиридоксаль выступает кофактором фермента декарбоксилазы;
• бромкрезоловый пурпурный и крезоловый красный являются индикаторами pH.

При внесении бактерий, сбраживающих декстрозу, в среде образуется кислота, pH снижается, а цвет индикатора изменяется с пурпурного на жёлтый. Образовавшаяся кислота стимулирует активность декарбоксилазы. Декарбоксилирование лизина приводит к образованию кадаверина. Образование амина кадаверина повышает pH среды, в результате чего цвет индикатора изменяется с жёлтого на пурпурный.

Если микроорганизм не образует соответствующий фермент, среда остаётся кислой и сохраняет жёлтую окраску. Каждый исследуемый изолят также необходимо инокулировать в пробирку с базальной средой без аминокислоты. После инкубации в пробирке с декарбоксилазной средой могут наблюдаться два слоя различного цвета — жёлтый и пурпурный. Перед интерпретацией результата пробирку следует осторожно встряхнуть.

Методика приготовления и проведения анализа

1. Приготовьте суспензию 20,52 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте среду по 5 мл в пробирки с завинчивающимися крышками.
4. Стерилизуйте пробирки в автоклаве при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 10 мин.
5. Охладите среду в пробирках, установив их в вертикальном положении.
6. Инокулируйте пробирки исследуемым изолятом.
7. Налейте поверх среды 2–3 мл стерильного минерального масла, чтобы защитить инокулированную среду от контакта с воздухом.
8. Инкубируйте пробирки в соответствии с принятой лабораторной методикой.
9. Перед интерпретацией результата осторожно встряхните пробирку, поскольку после инкубации могут образоваться слои жёлтого и пурпурного цвета.
10. Для каждого исследуемого изолята параллельно выполните посев в базальную среду без аминокислоты.

Контроль качества

Внешний вид

• Внешний вид сухой среды: однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до зеленовато-жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор пурпурного цвета без осадка.
• Реакция: реакция водного раствора концентрацией 2,05 % масс./об. при 25 °C.
• pH: 5,80–6,20.
• Номинальное значение pH: 6,0 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение не более 4 суток. Инокулированные пробирки покрывают стерильным минеральным маслом.

Обозначения:

• * Соответствующие номера WDCM.

• Ранее название Enterobacter aerogenes.

• $ Ранее название Proteus vulgaris.
• ^ Ранее название Pseudomonas aeruginosa.

Тип образца

Изолированный микроорганизм из клинических и неклинических образцов.

Ограничения применения

1. Инокулированные пробирки необходимо защищать от воздуха слоем стерильного минерального масла. Контакт среды с воздухом может вызвать подщелачивание её поверхности и сделать результат анализа недействительным.
2. Анализ проводят с изолированным микроорганизмом, выделенным из клинических или неклинических образцов. Среду нельзя использовать для смешанного посева.
3. Для полной идентификации микроорганизма необходимо выполнить дополнительные биохимические и серологические тесты.

Требования безопасности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Сбор, обращение с образцами и утилизация

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Использованные или непригодные препараты необходимо утилизировать безопасным способом — автоклавированием и/или сжиганием. При утилизации инфекционных материалов следует соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения сухой среды: в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–30 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности продукта.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухое, проветриваемое, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер следует плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды ожидаются при соблюдении инструкции на этикетке, использовании продукта в пределах срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Т