Глюкозо-солевой бульон с типолем HiMedia M621-500G (уп/500 гр)

Сухая питательная среда Глюкозо-солевой бульон с типолем HiMedia M621-500G (уп/500 г) для обогащения культур Vibrio parahaemolyticus и морских изолятов из пищевых продуктов. Применяется для выделения и количественного определения бактерий методом наиболее вероятного числа (MPN); состав соответствует методическим рекомендациям Роспотребнадзора МР 02.009-06.Саратов.2006.

Принцип измерения

Глюкозо-солевой бульон с типолем представляет собой специализированную среду для обогащения Vibrio parahaemolyticus из морепродуктов. Пептон и пептон HM B обеспечивают необходимые азотистые питательные вещества, а высокая концентрация хлорида натрия (3 %) способствует оптимальному росту галофильных бактерий V. parahaemolyticus. Глюкоза используется в качестве источника энергии, а типоль (Teepol) подавляет рост грамположительных организмов.

Область применения

Среда предназначена для анализа следующих типов образцов:

• Пищевые продукты (морепродукты).
• Клинические образцы: образцы кала, мазки из ран.

Методика проведения анализа

Подготовка образца

1. Взвесьте 50 г образца морепродуктов в блендере.
2. Добавьте 450 мл разбавляющей воды (фосфатно-солевого буфера, PBS) и перемешивайте в течение 1 мин при 8000 об/мин. Полученная смесь соответствует разведению 1:10.
3. При необходимости подготовьте разведения 1:100, 1:1000, 1:10000 или выше в PBS.

Посев и инкубация

1. Внесите по 10 мл разведения 1:10 в три пробирки, содержащие по 10 мл обогатительного бульона (Глюкозо-солевой бульон с типолем) двойной концентрации. Это соответствует порции в 1 г образца.
2. Аналогично внесите 10 мл в пробирки с однократной концентрацией бульона.
3. Если ожидается высокая обсемененность V. parahaemolyticus, анализ можно начать с разведения продукта 1:10.
4. Инкубируйте пробирки в течение суток при температуре 35 ± 2 °C.

Идентификация и подсчет

1. После инкубации петлей возьмите культуру из верхнего 1 см бульона (при наличии роста) и сделайте посев на агар TCBS (M189).
2. Инкубируйте посев в течение суток при 35 ± 2 °C.
3. Интерпретация результатов на агаре TCBS:
   • V. parahaemolyticus: круглые колонии зеленого или голубого цвета диаметром 2,3 мм.
   • V. alginolyticus: более крупные колонии желтого цвета.
4. Проведите дальнейшую биохимическую характеристику для подтверждения вида. При идентификации V. parahaemolyticus, V. cholera и V. vulnificus необходимо использовать соответствующие положительные контроли.
5. При подтверждении V. parahaemolyticus используйте исходное положительное разведение в обогатительном бульоне и таблицы MPN для трех пробирок для окончательного количественного определения.

Приготовление среды

1. Растворите 48,0 г компонента Part A в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 4,0 мл компонента Part B.
2. Осторожно нагрейте до полного растворения компонентов.
3. Разлейте среду по пробиркам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
5. Охладите до 45–50 °C.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Дополнительные параметры

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

*Соответствующие номера WDCM.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом помещении, защищенном от перепадов температур и источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 15–25 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования.
• Транспортировка проб: образцы следует хранить при умеренном охлаждении (около 7–10 °C) и анализировать как можно скорее для обеспечения выживаемости Vibrio и предотвращения разрастания сопутствующей морской микрофлоры.

Ограничения и предупреждения

• Среда предназначена только для профессионального использования в лабораторных условиях (In Vitro).
• Для окончательной идентификации необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.
• При работе с клиническими образцами и культурами следует соблюдать стандартные меры предосторожности и правила микробиологической безопасности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты подлежат безопасному удалению путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.