HiMedia M621-100G Глюкозо-солевой Teepol бульон (Twin pack)

Сухая питательная среда HiMedia M621-100G Глюкозо-солевой Teepol бульон (Twin pack) для обогащения культур Vibrio parahaemolyticus и морских изолятов из пищевых продуктов. Применяется для селективного выделения и количественного определения бактерий методом наиболее вероятного числа (MPN); вес упаковки составляет 100 г.

Принцип измерения

Глюкозо-солевой Teepol бульон представляет собой специализированную среду для обогащения Vibrio parahaemolyticus из морепродуктов. Пептон и HM пептон B обеспечивают необходимые азотистые питательные вещества, а высокая концентрация хлорида натрия (3 %) способствует росту галофильных бактерий V. parahaemolyticus. Глюкоза используется в качестве источника энергии, а Teepol (неионогенный ПАВ) подавляет рост грамположительных организмов.

Методика проведения анализа

Подготовка образцов

1. Взвесьте 50 г образца морепродуктов в блендере.
2. Добавьте 450 мл разбавляющей воды (фосфатно-солевого буфера, PBS) и перемешивайте в течение 1 мин при 8000 об/мин. Это создаёт разведение 1:10.
3. При необходимости подготовьте разведения 1:100, 1:1000, 1:10000 и выше в PBS.
4. Образец должен храниться при умеренном охлаждении (около 7–10 °C) и быть проанализирован как можно скорее для обеспечения выживаемости вибрионов и предотвращения разрастания сопутствующей морской микрофлоры.

Процедура посева и инкубации

1. Внесите по 10 мл разведения 1:10 в три пробирки, содержащие 10 мл обогатительного бульона (в двойной концентрации). Это соответствует порции в 1 г.
2. Аналогично внесите 10 мл в однократную концентрацию бульона.
3. Если ожидается высокая обсемененность V. parahaemolyticus, анализ можно начать с разведения продукта 1:10.
4. Инкубируйте среду в течение ночи при температуре 35 ± 2 °C.
5. Петлёй возьмите культуру из верхнего слоя (1 см) бульона, где наблюдается рост, и проведите посев штрихом на агар TCBS (M189).
6. После ночной инкубации при 35 ± 2 °C колонии V. parahaemolyticus на агаре TCBS выглядят как круглые, зеленые или голубоватые (диаметром 2,3 мм), в то время как колонии V. alginolyticus крупнее и имеют желтый цвет.
7. Проведите дальнейшую идентификацию с помощью биохимических тестов, используя соответствующие положительные контрольные организмы для V. parahaemolyticus, V. cholera и V. vulnificus.
8. При окончательной идентификации голубо-зеленых колоний как V. parahaemolyticus используйте таблицы MPN для трех пробирок для окончательного подсчета организмов.

Приготовление среды

1. Растворите 48,0 г компонента Part A в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 4,0 мл компонента Part B.
2. Осторожно нагрейте до полного растворения компонентов.
3. Разлейте по пробиркам и стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид:
  • Часть A: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета.
  • Часть B: бесцветная вязкая жидкость.
• Цвет и прозрачность готовой среды: желтый прозрачный раствор с очень небольшим осадком.
• Реакция: pH 8,8 ± 0,2 (для 4,8 % водного раствора с 0,4 % Teepol при 25 °C).
• Диапазон pH: 8,60–9,00.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Область применения

Среда предназначена для работы с клиническими образцами (образцы кала, мазки из ран) и пищевыми продуктами (морепродукты). Используется в профессиональных микробиологических лабораториях для диагностики in vitro.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: от +10 до +30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: от +15 до +25 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и меры предосторожности

• Для окончательной идентификации необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.
• При работе с клиническими образцами и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности и использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица).
• Утилизация отработанных сред должна осуществляться путем автоклавирования или инсинерации в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.