HiMedia M609S-500G Лакмусовый SM бульон

Порошкообразная питательная среда HiMedia M609S-500G Лакмусовый SM бульон с конечным pH 6,8 ± 0,1 при 25 °C. Среда предназначена для поддержания Lactobacilli и определения действия бактерий на молоко; получаемые реакции неспецифичны и требуют подтверждения дополнительными тестами.

Назначение

Лакмусовый молочный бульон применяется для поддержания Lactobacilli, определения действия бактерий на молоко и выявления бактерий, ответственных за пищевые отравления. Формуляция рекомендована комитетом Бюро индийских стандартов (BIS) по стандарту IS:5887, часть IV, 1976.

Состав

Состав, г/л:

Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,1.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности среды.

Методика приготовления

1. Взвесьте 105 г среды и суспендируйте в 1000 мл дистиллированной воды, непрерывно перемешивая.
2. Разлейте по 10 мл в пробирки размером 15 × 150 мм.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа; ≈1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 5 мин.
4. Не допускайте перегрева среды.

Принцип действия и интерпретация

Лакмусовый молочный бульон используется как индикатор бактериального воздействия на молоко. Лакмус выявляет кислотность, щёлочность и окислительно-восстановительные процессы. В молочной среде лакмус характеризуется меньшей токсичностью для микроорганизмов по сравнению с бромкрезоловым пурпурным.

Добавление декстрозы в концентрации 1 % масс./об. и/или дрожжевого экстракта в концентрации 5 % масс./об. ускоряет рост некоторых микроорганизмов, которые не растут в обычном лакмусовом молочном бульоне.

Для выявления Clostridium perfringens в воде:

1. Инокулируйте свежепрогретые пробирки с лакмусовым молочным бульоном различными объёмами воды.
2. Нагрейте пробирки при 80 °C в течение 10–15 мин, чтобы уничтожить неспорообразующие микроорганизмы.
3. Наблюдайте реакцию через каждые 24 ч.
4. Положительной считают реакцию «бурного сгустка» при 35 °C, которую регистрируют в течение периода до 5 суток.

Анаэробные условия в лакмусовом молочном бульоне можно создать добавлением небольшого железного гвоздя, предварительно нагретого, или 0,1 г восстановленного железа.

Обезжиренное молоко служит субстратом, который различные виды бактерий метаболизируют разными способами. Действие бактерий подразделяют на кислотную, щелочную и окислительно-восстановительную реакции.

Кислотная реакция

1. Розовое или красное окрашивание молока — результат ферментации лактозы и/или декстрозы в молоке.
2. Кислотная коагуляция — образование молочной кислоты с формированием сгустка казеина в прозрачной водянистой жидкости.
3. Бурный сгусток — образование газа в коагулированном казеиновом сгустке.

Щелочная реакция

1. Синее окрашивание молока — образование основных аминов или аммиака вследствие протеолиза.
2. Щелочная коагуляция с мягким синим сгустком — образование параказеина из казеина под действием фермента реннина.
3. Пептонизация — расщепление казеина, проявляющееся просветлением среды и растворением сгустка.

Окислительно-восстановительная реакция

Обесцвечивание среды, аналогичное виду свежеприготовленного автоклавированного лакмусового молочного бульона, — результат реакции лакмуса в глубине пробирки с ферментами-редуктазами. При этом удаляется кислород и образуется обесцвеченное соединение лейколакмус.

Ограничения

Реакции, получаемые в этой среде, неспецифичны. Для подтверждения результатов необходимо проведение дополнительных тестов.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный, свободно текучий порошок от розовато-фиолетового до серого цвета; допускается наличие мелких частиц.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: непрозрачный молочный раствор светло-фиолетового цвета.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 10,5 % масс./об. при 25 °C; pH 6,8 ± 0,1.
• Диапазон pH: 6,70–6,90.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение не более 14 суток; реакции различных интервалов инкубации регистрируют в процессе наблюдения.

Технические характеристики

• Назначение изделия: бульон.
• Масса: 500 г.
• Температура хранения сухой среды: ниже 30 °C.
• Условия хранения сухой среды: в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Отличие от обычных питательных сред

В отличие от сред без индикатора, лакмусовый молочный бульон позволяет одновременно регистрировать кислотные, щелочные и окислительно-восстановительные изменения, а также коагуляцию, пептонизацию, газообразование и обесцвечивание среды.