HiMedia M609-100G Лакмусовый SM бульон

Питательная микробиологическая среда HiMedia M609-100G Лакмусовый SM бульон в форме порошка с конечным pH 6,8 ± 0,2. HiMedia M609-100G применяется для поддержания культур лактобацилл и определения действия бактерий на молоко, включая ферментацию лактозы, восстановление лакмуса, образование сгустка, пептонизацию и газа.

Назначение

Лакмусовый SM бульон рекомендуется для поддержания культур лактобацилл и определения действия бактерий на молоко.

Среда используется для дифференциального определения различных метаболических функций бактерий в молоке, а также для поддержания и размножения молочнокислых бактерий. Типы образцов:

• молочные образцы;
• образцы воды.

Состав

Состав на 1 л среды:

* Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с рабочими параметрами; порошок SM эквивалентен сухому обезжиренному молоку.

Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 101 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, непрерывно перемешивая.
2. Разлейте среду порциями по 10 мл в пробирки размером 15 × 150 мм.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 psi (примерно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 5 мин.
4. Не допускайте перегрева среды.

Принцип действия и интерпретация

Молоко содержит углевод лактозу и три основные белковые компоненты: казеин, лактальбумин и лактоглобулин. Поэтому микроорганизм может проявлять в лакмусовом молоке одно или несколько метаболических свойств, характерных для определённого вида и позволяющих идентифицировать бактерии.

Определяемые метаболические функции:

• ферментация лактозы;
• восстановление лакмуса;
• образование сгустка;
• пептонизация, или переваривание белка;
• образование газа.

Лакмусовый SM бульон является дифференциальной средой для определения перечисленных метаболических функций. Среда также применяется для поддержания и размножения молочнокислых бактерий.

Лакмусовый бульон используется в молочной промышленности для определения действия бактерий на молоко. Лакмус служит индикатором кислотности, щёлочности и окислительно-восстановительного потенциала. В молочных средах лакмус оказывает меньшее токсическое действие на микроорганизмы, чем бромкрезоловый пурпурный.

Добавление декстрозы в концентрации 1 % масс./об. и/или дрожжевого экстракта в концентрации 5 % масс./об. ускоряет рост некоторых микроорганизмов, которые не растут в обычном лакмусовом молоке.

Для обнаружения Clostridium perfringens в воде:

1. Инокулируйте предварительно прогретые пробирки с лакмусовым молоком различными объёмами воды.
2. Нагревайте пробирки при 80 °C в течение 10–15 мин для уничтожения неспорообразующих микроорганизмов.
3. Инкубируйте при 35 °C до 5 суток.
4. Осматривайте пробирки каждые 24 ч и регистрируйте положительную реакцию бурного сгустка.

Анаэробные условия в лакмусовом молоке можно получить добавлением небольшого нагретого железного гвоздя или 0,1 г восстановленного железа в среду. Сухое обезжиренное молоко служит субстратом, который разные виды бактерий метаболизируют различными способами.

Кислая реакция

1. Розовая или красная окраска: ферментация лактозы молока и/или декстрозы в молоке.
2. Кислотная коагуляция: образование молочной кислоты с формированием казеинового сгустка в прозрачной водянистой жидкости.
3. Бурный сгусток: образование газа в коагулированном казеиновом сгустке.

Щелочная реакция

1. Синяя окраска молока: образование основных аминов или аммиака вследствие протеолиза.
2. Щелочная коагуляция: образование параказеина из казеина под действием фермента ренина с формированием мягкого синего сгустка.
3. Пептонизация: переваривание казеина, проявляющееся просветлением среды и растворением сгустка.

Окислительно-восстановительная реакция

Обесцвечивание среды, аналогичное реакции свежеприготовленного автоклавированного лакмусового молока: реакция лакмуса в глубине пробирки с ферментами-редуктазами приводит к удалению кислорода и образованию обесцвеченного соединения лейколакмуса. Реакции, полученные в этой среде, неспецифичны; для окончательной идентификации необходимо провести дополнительные исследования.

Типы образцов и обращение с ними

Для молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб с учётом руководств и местных стандартов.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Технические характеристики

• Назначение изделия: бульон
• Масса: 100 г
• Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,60–7,00
• Температура хранения концентрата: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 15–30 °C

Контроль качества

Внешний вид

Порошок однородный, сыпучий, от розовато-фиолетового до серого цвета; может содержать частицы от очень мелких до мелких.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Непрозрачный молочный раствор светло-фиолетового цвета.

Реакция

Реакцию определяют для водного раствора концентрацией 10,1 % масс./об. при 25 °C.

pH: 6,8 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение до 14 суток; реакции регистрируют через различные интервалы во время инкубации.

Ключ: (*) соответствующие номера WDCM.

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Условия хранения и срок годности

• Хранить продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Приготовленную среду хранить при температуре 15–30 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывать ёмкость.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются наилучшим образом при использовании в течение установленного срока годности.

Ограничения применения

1. Некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост из-за различий в пищевых потребностях.
2. Для полной идентификации необходимы дополнительные биохимические и серологические исследования.

Меры безопасности

• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Для уточнения требований безопасности обращайтесь к соответствующим паспортам безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.