HiMedia M609-100G Лакмусовый SM бульон

Дифференциальная питательная среда HiMedia M609-100G Лакмусовый SM бульон для поддержания культур Lactobacilli и определения воздействия бактерий на молоко. Применяется для анализа молочных и водных проб; позволяет идентифицировать микроорганизмы по типу метаболизма лактозы и белков молока.

Принцип измерения и интерпретация

Среда основана на использовании обезжиренного молока как субстрата, содержащего углевод лактозу и основные белки: казеин, лактальбумин и лактоглобулин. Лакмус служит индикатором кислотности и щелочности, а также обладает окислительно-восстановительным потенциалом, что делает его менее токсичным для микроорганизмов по сравнению с бромокрезоловым пурпуром.

Метаболические функции бактерий в лакмусовом молоке классифицируются следующим образом:

Кислая реакция

• Изменение цвета с розового на красный: ферментация лактозы молока и/или декстрозы.
• Кислотное свертывание: образование казеинового сгустка в прозрачной водянистой жидкости вследствие продукции молочной кислоты.
• «Бурный сгусток» (Stormy clot): газообразование внутри свернувшегося казеинового сгустка.

Щелочная реакция

• Синий цвет молока: протеолиз с образованием основных аминов или аммиака.
• Щелочное свертывание: образование параказеина под действием фермента реннина с формированием мягкого синего сгустка.
• Пептонизация: переваривание казеина, проявляющееся осветлением среды и растворением сгустка.

Окислительно-восстановительная реакция

• Обесцвечивание среды: реакция лакмуса в глубине пробирки под действием редуктазных ферментов при удалении кислорода, что приводит к образованию бесцветного соединения лейкоилкмуса. Данная реакция не является специфичной и требует подтверждения дополнительными тестами.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 101 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды при постоянном перемешивании.
2. Разлейте по 10 мл в пробирки размером 15 × 150 мм.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 5 минут. Важно: избегайте перегрева среды.

Особенности применения

• Для обнаружения Clostridium perfringens в воде: инокулируйте свежепрогретые пробирки лакмусового молока различными объемами воды, затем прогрейте при 80 °C в течение 10–15 минут для уничтожения неспорообразующих организмов. Инкубируйте при 35 °C до 5 суток, проверяя каждые 24 часа на наличие реакции «бурного сгустка».
• Создание анаэробиоза: в среду можно добавить небольшой нагретый железный гвоздь или 0,1 г восстановленного железа.
• Стимуляция роста: добавление 1 % (масс./об.) декстрозы и/или 5 % (масс./об.) дрожжевого экстракта ускоряет рост некоторых организмов, которые не растут в чистом лакмусовом молоке.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 6,8 $\pm$ 0,2
• Происхождение компонентов: животное
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)
• Вес: 100 г

Контроль качества

• Внешний вид: гомогенный свободнотекучий порошок от розово-пурпурного до серого цвета, могут присутствовать мелкие частицы.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-пурпурный непрозрачный молочный раствор.
• pH водного раствора (10,1 % масс./об.) при 25 °C: 6,8 $\pm$ 0,2 (диапазон 6,60–7,00).

Культуральные характеристики

Характеристики определяются после инкубации при 35–37 °C в течение до 14 суток с записью реакций через определенные интервалы.

Область применения

Среда предназначена для анализа следующих типов образцов:

• Молочные продукты и пробы.
• Пробы воды.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 15–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть для предотвращения образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и предостережения

• Некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост из-за вариаций в питательном составе.
• Для окончательной идентификации микроорганизмов требуются дополнительные биохимические и серологические тесты.
• При работе с образцами и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности. Контаминированные материалы подлежат обязательному автоклавированию перед утилизацией.