Питательная микробиологическая среда HiMedia M503-100G EMB бульон производства HiMedia — порошковый бульон для дифференциации грамотрицательных кишечных бактерий по ферментации углеводов. HiMedia M503-100G EMB бульон применяют для анализа клинических и не клинических образцов, включая фекалии, пищевые продукты и воду, с последующей биохимической и серологической идентификацией.

Назначение

Среда рекомендована для дифференциации грамотрицательных кишечных бактерий из клинических и не клинических образцов.

Тип образцов:

• клинические образцы — фекалии;
• пищевые образцы;
• образцы воды.

Полная идентификация микроорганизмов требует проведения дополнительных биохимических и серологических тестов.

Состав

Состав среды:

Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров рабочих характеристик среды.

Принцип действия и интерпретация

Среды с эозином и метиленовым синим (EMB) первоначально разработаны Holt-Harris и Teague, затем модифицированы Levine. Состав EMB-бульона объединяет формулы Levine и Holt-Harris и Teague: содержит пептический перевар животной ткани и фосфат, рекомендованные Levine, а также два углевода, предложенные Holt-Harris и Teague.

EMB-бульон имеет состав, аналогичный EMB-агару, но не содержит агара.

• Метиленовый синий и эозин Y в ограниченной степени подавляют рост грамположительных бактерий.
• Эозин Y и метиленовый синий выполняют функцию дифференциальных индикаторов при ферментации углеводов.
• Соотношение эозина и метиленового синего составляет приблизительно 6:1.
• Сахароза добавлена как альтернативный источник углеводов для типичных лактозоферментирующих грамотрицательных палочек, которые иногда не ферментируют лактозу либо ферментируют её медленно.
• Колиформные бактерии образуют пурпурно-чёрный бульон вследствие поглощения комплекса красителей метиленового синего и эозина при снижении pH.
• Неферментирующие микроорганизмы, вероятно, повышают pH окружающей среды за счёт окислительного дезаминирования белка; это солюбилизирует комплекс метиленового синего и эозина, в результате чего бульон становится бесцветным.
• Некоторые штаммы видов Salmonella и Shigella не растут в присутствии эозина и метиленового синего.
• Пептон служит источником углерода, азота и других необходимых для роста питательных веществ.
• Лактоза и сахароза являются источниками энергии в качестве ферментируемых углеводов.
• Эозин Y и метиленовый синий служат дифференциальными индикаторами.
• Дикалий гидрофосфат буферизует среду.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 22,46 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Перемешайте до получения однородной суспензии.
3. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
4. Разлейте среду в пробирки или колбы в необходимом объёме.
5. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/дюйм² (ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин. Не допускайте перегрева.
6. Охладите среду до 45–50 °C.
7. Встряхните среду для окисления метиленового синего, то есть восстановления его синей окраски, и суспендирования хлопьевидного осадка.

Пробоотбор и обращение с образцами

• Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.
• Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам.
• Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным нормативам.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Изделие предназначено для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с клиническими образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Контроль качества

Внешний вид порошка: от светло-розового до пурпурного цвета, однородный, сыпучий.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: раствор красновато-пурпурного цвета, опалесцирующий, с зеленоватым оттенком и мелкодисперсным осадком в пробирках.

Реакция: реакция водного раствора концентрацией 2,25 % масс./об. при 25 °C.

pH по данным контроля: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее обозначался как Enterobacter aerogenes.

Технические характеристики

• Назначение изделия: бульон.
• Физическая форма: порошок.
• Происхождение компонентов: животное.
• Тип продукта: стандартный.
• Тип упаковки: ПЭВП (HDPE).
• Масса: 100 г.
• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–30 °C.
• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.
• pH водного раствора концентрацией 2,25 % масс./об.: 7,00–7,40.
• Расход для приготовления: 22,46 г/1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
• Стерилизация: автоклавирование при 121 °C в течение 15 мин и давлении 15 фунтов/дюйм², ориентировочно 0,103 МПа.

Хранение и срок годности

Храните сухую среду при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду храните при температуре 15–30 °C. Используйте до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия бутылку необходимо плотно закрывать и хранить продукт в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию продукта.

Храните контейнер в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Храните среду вдали от света для предотвращения фотоокисления.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Применение и ограничения

Среда предназначена для профессионального микробиологического контроля клинических, пищевых и водных образцов. Приготовление требует соблюдения режима растворения, автоклавирования, охлаждения и защиты от света; перегрев среды не допускается.

Культуральная реакция гарантируется при использовании среды согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованном температурном диапазоне. Отличительное свойство EMB-бульона — использование одновременно метиленового синего и эозина Y для ограничения роста грамположительных бактерий и визуальной дифференциации ферментирующих и неферментирующих микроорганизмов по изменению окраски среды.

Состав и упаковка

• Форма выпуска: порошок.
• Упаковка: контейнер из ПЭВП (HDPE).
• Масса: 100 г.