HiMedia M503-100G EMB бульон

Сухая питательная среда HiMedia M503-100G EMB бульон (эозин-метиленовый синий) для дифференциации грамотрицательных энтерических бактерий. Применяется при исследовании клинических, пищевых и водных образцов; вес упаковки 100 г.

Принцип измерения и интерпретация

Среда EMB бульон представляет собой комбинацию формул Левина, Холта-Харриса и Тига. Она содержит пептический гидролизат тканей животных, фосфат, а также два углевода (лактозу и сахарозу). Состав EMB бульона идентичен агару EMB, но не содержит агара.

Метиленовый синий и эозин-Y в определенной пропорции (примерно 6:1) в ограниченной степени подавляют рост грамположительных бактерий и служат дифференциальными индикаторами ферментации углеводов:

• Колиформы: при снижении pH поглощают комплекс красителей метиленового синего и эозина, что приводит к окрашиванию бульона в пурпурно-черный цвет.
• Неферментирующие бактерии: за счет окислительного дезаминирования белков повышают pH окружающей среды, что приводит к растворению комплекса красителей и делает бульон бесцветным.
• Особенности: некоторые штаммы Salmonella и Shigella могут не расти в присутствии эозина и метиленового синего.

Компоненты среды:

• Пептон: источник углерода, азота и основных питательных веществ.
• Лактоза и сахароза: источники энергии (ферментируемые углеводы). Сахароза добавлена как альтернативный источник для грамотрицательных бацилл, которые медленно ферментируют лактозу или не ферментируют её вовсе.
• Эозин-Y и метиленовый синий: дифференциальные индикаторы.
• Дикалийгидрофосфат: буферный агент.

Область применения

Среда используется для анализа следующих типов образцов:

• Клинические образцы (в том числе фекалии).
• Образцы пищевых продуктов.
• Образцы воды.

Методика приготовления и стерилизации

1. Растворить 22,46 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Перемешать до получения однородной суспензии. При необходимости нагреть для полного растворения среды.
3. Разлить по пробиркам или колбам.
4. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут. Избегать перегрева.
5. Охладить до 45–50 °C и встряхнуть среду для окисления метиленового синего (восстановления синего цвета) и распределения хлопьевидного осадка.

Меры предосторожности: Хранить готовую среду в защищенном от света месте во избежание фотоокисления.

Технические характеристики

Общие параметры

• Назначение: Бульон
• Вес: 100 г
• Физическая форма: Порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)
• Происхождение компонентов: Животное
• Конечный pH (при 25 °C): 7,2 $\pm$ 0,2
• Диапазон pH: 7,00–7,40

Состав (г/л)

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от светло-розового до пурпурного цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: красно-пурпурный опалесцирующий раствор с зеленоватым оттенком и мелкодисперсным осадком в пробирках.
• Реакция: pH 7,2 $\pm$ 0,2 для 2,25% (масса/объем) водного раствора при 25 °C.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

* Соответствующие номера WDCM. Klebsiella aerogenes ранее была известна как Enterobacter aerogenes.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 15–30 °C.
• Требования: Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон следует плотно закрывать для предотвращения образования комков.

Ограничения и безопасность

• Среда предназначена для диагностики in vitro и профессионального использования.
• Для полной идентификации микроорганизмов необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.
• При работе с клиническими образцами следует соблюдать стандартные меры предосторожности и использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица).
• Контаминированные материалы перед утилизацией должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации.