Бульон Иллнерса HiMedia M466-500G (уп/500 гр)

Микробиологическая питательная среда Бульон Иллнерса HiMedia M466-500G (уп/500 гр) — сухой порошковый препарат для культивирования анаэробных клостридий. Бульон Иллнерса применяют для индукции спорообразования Clostridium perfringens при анаэробной инкубации.

Назначение и область применения

Бульон Иллнерса рекомендуется для индукции спорообразования Clostridium perfringens. Споры редко обнаруживаются в культуре и могут служить диагностическим признаком, однако их получают при культивировании на среде Иллнерса.

Рутинная видовая идентификация клостридий включает морфологические исследования, биохимические тесты и определение специфических токсинов. Все клостридии образуют споры, но значительно различаются по способности к спорообразованию; для некоторых видов может потребоваться длительная инкубация.

Принцип действия и интерпретация

Clostridium perfringens — грамположительные палочки, часто образующие капсулу. В средах, содержащих сахара, клетки Clostridium обычно короче, а в средах с белковыми компонентами могут становиться нитевидными.

Споры образуются, как правило, в небольшом количестве и не формируются в присутствии сбраживаемых углеводов. Обычно образуются овальные споры, расположенные субтерминально или центрально; споры не имеют вздутия. Для получения спор используют специальные среды, включая Бульон Иллнерса.

Протеозный пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают клостридии необходимыми питательными веществами для роста. Спорообразование обычно стимулируется источником углеводов, поэтому в состав среды включён крахмал. Сульфат и фосфат выполняют буферную функцию и дополнительно способствуют спорообразованию.

Клостридии являются анаэробными организмами. Анаэробные условия могут быть обеспечены нагреванием среды при 100 °C в течение 10 мин с последующим охлаждением непосредственно перед инокуляцией.

Приготовление среды и методика инокуляции

1. Суспендируйте 67,6 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду по пробиркам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Непосредственно перед инокуляцией нагрейте среду при 100 °C в течение 10 мин для обеспечения анаэробных условий и охладите.
6. Используйте достаточное количество инокулята: пипеткой внесите 0,5 мл активно растущей 4–12-часовой культуры мясного бульона на дно пробирки с приготовленной средой.
7. Инкубируйте посевы в анаэробных условиях.

Состав

Формула среды скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Контроль качества

Внешний вид

Цвет — от кремового до жёлтого; порошок однородный, сыпучий.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Раствор янтарного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция среды

Реакция 6,76 % масс./об. водного раствора при 25 °C: pH 7,8 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,60–8,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют в анаэробных условиях после инкубации при 35–37 °C в течение 24–76 ч.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: ниже 30 °C.
• Упаковка: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Регистрационные данные

• Производитель: HiMedia.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03706.
• Назначение изделия: бульон.