HiMedia M439S-100G Нитратный бульон

Сухая питательная среда HiMedia M439S-100G Нитратный бульон для идентификации бактерий по способности восстанавливать нитраты. Применяется для дифференциации представителей семейства Enterobacteriaceae и количественного определения Bacillus cereus методом подсчета колоний при 30 °C.

Принцип измерения и интерпретация

Нитратный бульон используется для определения способности микроорганизмов восстанавливать нитраты, что является важным дифференциальным признаком для идентификации различных типов бактерий, особенно семейства Enterobacteriaceae.

Для глюкозоферментирующих грамотрицательных бацилл продукция азота из нитратов служит важным диагностическим тестом. Восстановление нитратов обычно представляет собой анаэробное дыхание, при котором организм получает кислород из нитратов. Представители Enterobacteriaceae характерно восстанавливают нитраты до нитритов, которые вступают в реакцию с сульфаниловой кислотой и N,N-диметил-1-нафтиламином, образуя красное окрашивание (реакция Гриесса).

Если организм растет быстро и активно восстанавливает нитраты, тест следует проводить после короткого периода инкубации, так как нитриты могут быть далее восстановлены до газообразного азота. Неферментирующие и другие грамотрицательные бациллы различаются по способности восстанавливать нитраты; некоторые из них способны к денитрификации (восстановлению нитрата до азота).

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Растворите 39 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте раствор до полного растворения компонентов.
3. Разлейте среду по пробиркам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.

Приготовление тест-реагентов

1. Сульфаниловая кислота: растворите 8 г сульфаниловой кислоты в 1 л 5 N уксусной кислоты.
2. Реагент $\alpha$-нафтиламина: растворите 5 г $\alpha$-нафтиламина в 1 л 5 N уксусной кислоты.

Процедура тестирования

1. В пробирку с исследуемой культурой добавьте по несколько капель каждого из двух реагентов.
2. Появление отчетливого красного или розового окрашивания указывает на восстановление нитратов.
3. Результат необходимо зафиксировать в течение 5–10 секунд, так как цвет быстро блекнет.
4. Обязательно протестируйте контрольную (непосеянную) пробирку.
5. Если розовое окрашивание не появилось, добавьте щепотку цинковой пыли для подтверждения отсутствия нитратов в среде.

Важно: Восстановление нитратов не является подтверждающим тестом. Полная идентификация должна включать морфологический анализ, определение реакции по Граму, а также биохимические и серологические тесты. Избыток цинка может привести к ложноотрицательной реакции.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры

• Конечный pH (при 25 °C): 7,0 $\pm$ 0,2
• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий раствор
• Вес: 100 г
• Тип продукта: стандартная среда
• Физическая форма: порошок
• Материал упаковки: ПНД (HDPE)
• Происхождение компонентов: животное

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухого порошка: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.