Нитратный бульон HiMedia M439-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда нитратный бульон HiMedia M439-500G (уп/500 гр) для определения нитратредуцирующих бактерий. Применяется для идентификации микроорганизмов, в том числе семейства Enterobacteriaceae, и подсчёта Bacillus cereus в соответствии со стандартом ISO 7932:1993.

Принцип измерения

Нитратный бульон предназначен для определения способности бактерий восстанавливать нитраты. Нитрат калия (KNO₃) в составе среды служит субстратом. В зависимости от вида бактерий, нитраты могут восстанавливаться до нитритов, аммиака или газообразного азота.

Присутствие нитритов определяется добавлением сульфаниловой кислоты и раствора $\alpha$-нафтиламина (реакция Гриесса). Образование красно-фиолетового окрашивания (за счёт формирования красного диазониевого красителя п-сульфензобензол-азо-$\alpha$-нафтиламина) свидетельствует о восстановлении нитрата до нитрита.

Если окрашивание не развилось, это означает, что либо нитрат не восстановился, либо произошло дальнейшее восстановление нитрита до аммиака или азота. Для проверки добавляют щепотку цинковой пыли: цинк восстанавливает оставшийся нитрат до нитрита, вызывая красное окрашивание. Отсутствие красного цвета после добавления цинка подтверждает полное восстановление нитрата.

Методика проведения анализа

1. В пробирку с исследуемой культурой добавьте по несколько капель каждого реагента: сульфаниловой кислоты (R015) и раствора $\alpha$-нафтиламина (R009).
2. Оцените появление красного или розового окрашивания, что указывает на восстановление нитрата.
3. Обязательно проведите аналогичный тест с контрольной (непосевной) пробиркой.
4. При отсутствии розового окрашивания добавьте щепотку цинковой пыли для подтверждения отсутствия нитрата в среде.

Приготовление и стерилизация

1. Растворите 9,00 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте раствор до полного растворения компонентов.
3. Разлейте среду по пробиркам, колбам или другим подходящим сосудам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C и давлении $\approx$0,1 МПа (15 psi) в течение 15 минут.

Технические характеристики

Состав согласно ISO 7932:1993 (г/л)

Состав M439-Nitrate Medium (г/л)

Общие параметры

Культуральные характеристики

Характеристики определяются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч. Восстановление нитратов фиксируется после добавления 0,5 мл сульфаниловой кислоты (R015) и 0,5 мл раствора $\alpha$-нафтиламина (R009).

* Соответствующие номера WDCM. Klebsiella aerogenes ранее была известна как Enterobacter aerogenes.

Область применения и ограничения

Среда используется для работы с изолированными микроорганизмами из клинических и неклинических образцов.

Ограничения:

• Тест на восстановление нитратов не является подтверждающим; полная идентификация бактерий должна включать морфологический, грам-отрицательный, биохимический и серологический анализы.
• Избыток цинковой пыли может привести к ложноотрицательному результату.
• При использовании $\alpha$-нафтиламина цвет положительной реакции может быстро блекнуть.
• Из-за высокой чувствительности теста необходимо всегда проверять стерильный контроль на отсутствие нитритов в среде.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 15–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты подлежат безопасному удалению путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.