Нитратный бульон HiMedia M439-100G для определения способности бактерий восстанавливать нитраты. Рекомендуется для дифференциации и идентификации различных типов бактерий, в особенности семейства Enterobacteriaceae; состав и критерии эффективности соответствуют стандарту ISO 7932:1993.

Принцип измерения

Нитратный бульон используется для определения способности микроорганизмов восстанавливать нитраты. Нитрат калия в составе среды служит субстратом: определенные бактерии превращают его в нитриты, аммиак или газообразный азон.

Присутствие нитритов обнаруживается путем добавления сульфаниловой кислоты и раствора $\alpha$-нафтиламина. Образование красного или фиолетового окрашивания (реакция Грисса) свидетельствует о восстановлении нитрата до нитрита. Если окрашивание отсутствует, это означает, что нитрат либо не восстанавливался, либо был восстановлен далее до аммиака или азота. Для проверки последнего добавляют щепотку цинковой пыли: цинк восстанавливает оставшийся нитрат до нитрита, вызывая красное окрашивание. Отсутствие цвета после добавления цинка подтверждает полное восстановление нитрата.

Методика проведения анализа

1. Подготовка среды: суспендируйте 9,00 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды. При необходимости нагрейте до полного растворения.
2. Стерилизация: разлейте среду в пробирки или колбы и стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C и давлении $\approx 0,1$ МПа (15 фунтов) в течение 15 минут.
3. Посев: внесите изолированные микроорганизмы из клинических или неклинических образцов в среду.
4. Проведение теста:
   • В пробирку с культурой добавьте по несколько капель сульфаниловой кислоты (R015) и раствора $\alpha$-нафтиламина (R009).
   • Появление отчетливого красного или розового цвета указывает на восстановление нитрата.
   • Обязательно протестируйте контрольную (неинокулированную) пробирку.
   • При отсутствии розового цвета добавьте щепотку цинковой пыли для подтверждения отсутствия нитрата в среде.

Технические характеристики

Общие параметры

• Назначение: определение восстановления нитратов бактериями
• Вес: 100 г
• Физическая форма: порошок
• Цвет порошка: от кремового до желтого, однородный, свободнотекучий
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный прозрачный раствор
• Происхождение компонентов: животное
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)

Параметры среды

• pH (при 25 °C): 7,0 $\pm$ 0,2 (диапазон 6,80–7,20)

Состав (ISO 7932:1993)

Состав (M439-Nitrate Medium)

Культуральные характеристики

Характеристики определяются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов. Восстановление нитратов фиксируется после добавления 0,5 мл сульфаниловой кислоты (R015) и 0,5 мл раствора $\alpha$-нафтиламина (R009).

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее была известна как Enterobacter aerogenes.

Ограничения и предостережения

• Тест на восстановление нитратов не является подтверждающим; полная идентификация бактерий должна включать морфологический, грам-отрицательный, биохимический и серологический анализы.
• Избыток цинковой пыли может привести к ложноотрицательной реакции.
• При использовании $\alpha$-нафтиламина цвет положительной реакции может быстро блекнуть.
• Из-за высокой чувствительности теста необходимо всегда использовать неинокулированный контроль для проверки отсутствия нитритов в среде.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 15–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.
• Утилизация: отработанные среды подлежат автоклавированию или сжиганию в соответствии с лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.