Бульон Омата для трепонем и фузобактерий HiMedia M412-100G (уп/500 гр)

Элективная питательная среда Бульон Омата для трепонем и фузобактерий HiMedia M412-100G (уп/500 гр) производства HiMedia. Предназначена для массового культивирования Treponema pallidum (штамм Reiter) с целью выработки антигена и проведения других исследований.

Принцип действия

Среда Spirolate Broth (бульон Омата) была разработана для культивирования оральных фузобактерий и используется для выращивания трепонем Рейтера в жидкой среде без агара. Триптон и дрожжевой экстракт обеспечивают азотистые факторы роста, минералы и витамины комплекса B. Декстроза служит источником углерода, а хлорид натрия поддерживает осмотический баланс. Тиогликолят минимизирует парциальное давление кислорода, создавая оптимальные условия для роста трепонем. L-цистеин гидрохлорид выступает в роли восстановителя и обладает низкой токсичностью для фузобактерий. Добавление TEM-4TR обеспечивает среду жирными кислотами, что стимулирует рост Treponema pallidum.

Состав

Состав, г/л:

Конечный pH (при 25 °C): 7,1 ± 0,2.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Растворить 29 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости добавить 0,25 г TEM-4TR (диэтилтартратного эфира моноглицеридов животного происхождения).
3. Нагревать при постоянном перемешивании и кипятить в течение 1 минуты.
4. Разлить в пробирки, заполняя их наполовину (примерно 15–20 мл для пробирок длиной 152 мм / 6″). При использовании более крупных контейнеров необходимо поддерживать соотношение площади поверхности к объему, аналогичное пробиркам.
5. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 lbs) в течение 15 минут.
6. Охладить до 45–50 °C и асептически добавить 10 % (об/об) инактивированной сыворотки овцы, кролика или быка.

Посев и инкубация

1. В среду вносят по 0,05 мл аликвот 7-дневной чистой культуры, выращенной на тиогликолятной среде без индикатора с добавлением 10 % инактивированной сыворотки овцы, кролика или быка.
2. Инкубировать в анаэробной атмосфере при температуре 35–37 °C не менее 7 суток.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-соломенный прозрачный или слегка опалесцирующий раствор.
• Реакция: pH 2,9 % (масса/объем) водного раствора при 25 °C составляет 7,1 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются с добавлением 10 % инактивированной сыворотки овцы/кролика/быка после инкубации при 35–37 °C в течение минимум 7 суток в анаэробных условиях.

Область применения и ограничения

Среда применяется для выделения и культивирования спирохет, в частности трепонем и фузобактерий.

• Ограничения: для предотвращения ошибочных результатов рекомендуется использовать чистую культуру, прошедшую 7 дней роста.
• Меры предосторожности: только для диагностики in vitro и профессионального использования. Требуется использование средств индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица) и соблюдение правил работы с инфекционным материалом.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранить порошок в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом помещении, защищенном от источников возгорания и экстремальных температур.
• Готовую среду хранить при температуре 2–8 °C.
• Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты подлежат безопасному удалению путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.