HiMedia M391-100G Бульон Мюллера-Хинтона

Порошковая питательная бактериологическая среда HiMedia M391-100G Бульон Мюллера-Хинтона производства HiMedia с конечным значением pH 7,3 ± 0,1. Применяется для определения чувствительности бактериальных штаммов к антибактериальным препаратам методом серийных разведений в бульоне и предназначена для чистых культур выделенных микроорганизмов.

Назначение

Бульон Мюллера—Хинтона предназначен для определения чувствительности бактериальных штаммов к антибактериальным препаратам методом серийных разведений в бульоне. Метод позволяет оценивать минимальную ингибирующую концентрацию (МИК) антибактериального препарата.

Тип образца: выделенный микроорганизм.

Среда рекомендована только для тестирования чистых культур.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Настой HM B эквивалентен настою говядины. Acicase™ эквивалентен кислотному гидролизату казеина.

Конечное значение pH при 25 °C: 7,3 ± 0,1.

Технические характеристики

Методика приготовления

1. Приостановите 21,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Тщательно перемешайте.
4. Разлейте среду в пробирки или колбы в требуемом объёме.
5. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов (ориентировочно ≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.

Перед автоклавированием рекомендуется прокипятить среду, чтобы предотвратить оседание крахмала на дне.

Принцип действия и интерпретация

Бульон Мюллера—Хинтона представляет собой стабильную бактериологическую питательную среду без сыворотки. Изначально среда поддерживала рост двух требовательных к условиям культивирования микроорганизмов — meningococcus и gonococcus. В дальнейшем состав был усовершенствован добавлением катионов для повышения восстановления Pseudomonas и культивирования большинства патогенных бактерий, встречающихся в клинической практике.

Бульон Мюллера—Хинтона и его агаровая разновидность применяются для стандартизированных исследований методом серийных разведений в бульоне или методом диффузии из диска при оценке активности антибиотиков. Результат обычно выражают через минимальную ингибирующую концентрацию (МИК). Методика определения чувствительности бактерий к антибиотикам с использованием бульона Мюллера—Хинтона рекомендована Институтом клинических и лабораторных стандартов (CLSI), включая актуализированные критерии отнесения штаммов к устойчивым (R) или чувствительным (S).

Пептон HM B и Acicase™ обеспечивают среду азотистыми соединениями, углеродом, серой и другими необходимыми питательными веществами. Крахмал действует как защитный коллоид, связывающий токсичные вещества, присутствующие в среде.

Компоненты подобраны с низким содержанием тимина и тимидина, определяемым по значениям МИК для Enterococcus faecalis при применении комбинации сульфаметоксазола и триметоприма (SXT).

При выполнении метода серийных разведений в бульоне рекомендуется наличие в среде следующих концентраций катионов:

• кальций (Ca²⁺): 20–25 мг/л;
• магний (Mg²⁺): 10–12,5 мг/л.

Содержание катионов в среде обычно недостаточно. При необходимости добавления кальция или магния необходимо учитывать уже присутствующую в бульоне концентрацию катионов и рассчитывать количество добавляемых солей с её учётом.

Для приготовления маточных растворов дополнительных катионов рекомендуются следующие составы:

• 8,36 г MgCl₂·6H₂O в 100 мл раствора содержит 10 мг Mg²⁺/мл;
• 3,68 г CaCl₂·2H₂O в 100 мл раствора содержит 10 мг Ca²⁺/мл.

В качестве альтернативы используется бульон Мюллера—Хинтона № 2 с контрольным содержанием катионов (M1657), в котором концентрации катионов скорректированы в соответствии со стандартными методическими требованиями.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид порошка: однородный, сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор светло-янтарного цвета в пробирках.

Реакция

Реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 2,1 % при 25 °C: pH 7,3 ± 0,1.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Каждая партия среды проверяется на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа. Для любых других микроорганизмов пользователь должен самостоятельно валидировать пригодность среды с учётом конкретных требований исследования.

Требования к образцам и обращению

Для отбора и обращения с образцами необходимо применять соответствующие методы работы с биологическим материалом в соответствии с установленными лабораторными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Ограничения применения и мешающие факторы

1. Разные микроорганизмы предъявляют неодинаковые требования к условиям роста и могут демонстрировать на среде различную картину роста.
2. Среда рекомендована для определения чувствительности к антибактериальным препаратам только чистых культур.
3. В отдельных случаях результаты определения чувствительности к антибиотикам в условиях in vitro могут не совпадать с результатами действия препарата в организме.
4. Значение pH среды влияет на чувствительность к аминогликозидам, тетрациклинам и хинолонам.
5. Содержание Ca²⁺ и Mg²⁺ влияет на результаты определения чувствительности к аминогликозидам и тетрациклинам.
6. При использовании микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа, пригодность среды необходимо подтвердить отдельной валидацией.

Условия эксплуатации, хранения и срок годности

• Температура хранения закрытого продукта: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–30 °C.
• Условия хранения: плотно закрытая ёмкость.
• Дополнительные условия: сухое проветриваемое помещение, защита от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить в сухом состоянии.
• Порошок обладает гигроскопичностью; ненадлежащее хранение может привести к образованию комков.
• После каждого использования ёмкость необходимо плотно закрывать.
• Продукт следует использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики среды гарантируются при соблюдении инструкции на этикетке, рекомендованной температуры хранения и использовании в пределах срока годности.

Меры предосторожности

Перед открытием контейнера необходимо ознакомиться с этикет