Минимальный бульон Дэвиса с декстрозой HiMedia M389-500G (уп/500 гр)

Сухая питательная среда Минимальный бульон Дэвиса с декстрозой HiMedia M389-500G (уп/500 гр) производства HiMedia. Рекомендуется для изоляции и характеризации нутриентных мутантов Escherichia coli.

Принцип измерения

Минимальные среды содержат только те питательные вещества, которые необходимы для роста штаммов Escherichia coli дикого типа. Нутриентные мутанты E. coli, полученные путем воздействия ультрафиолетового излучения на дикий тип, требуют для роста полноценной питательной среды. Путем добавления специфических добавок в минимальную среду можно изучать нутриентные характеристики мутантов.

В составе среды:

• Декстроза: источник энергии.
• Гидрофосфат калия и дигидрофосфат калия: обеспечивают буферизацию среды.
• Сульфат магния и сульфат аммония: источники ионов, имитирующих метаболизм.

Методика проведения анализа

Для скрининга мутантов на потребность в аминокислотах, витаминах, нуклеиновых кислотах или других веществах в минимальный бульон добавляют соответствующие нутриенты (например, казеиновые аминокислоты плюс триптофан, смесь водорастворимых витаминов, экстракты дрожжей или нуклеиновых кислот).

Порядок проведения опыта:

1. Суспензию клеток E. coli дикого типа облучают и культивируют на минимальном агаре (M512), дополненном всеми необходимыми компонентами для роста. Это позволяет расти как клеткам дикого типа (прототрофам), так и мутантным клеткам.
2. Отобранные колонии переносят в минимальный бульон Дэвиса (без добавок) и в минимальный бульон Дэвиса, дополненный необходимыми компонентами роста.
3. Инкубируют при 35 °C в течение 24 часов.
4. Результат: рост в дополненном бульоне при отсутствии роста в базовом минимальном бульоне указывает на наличие мутанта по данному конкретному фактору.

Приготовление и стерилизация

1. Растворить 11,6 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть для полного растворения среды.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Тщательно перемешать и разлить по емкостям.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечный pH (при 25 °C): 7,0 $\pm$ 0,2

Общие параметры:

Контроль качества

• Внешний вид: белый или кремовый гомогенный свободно текущий порошок.
• Цвет и прозрачность готовой среды: бесцветный прозрачный раствор в пробирках.
• Реакция: pH 1,16% (масса/объем) водного раствора при 25 °C составляет 7,0 $\pm$ 0,2.
• Диапазон pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Дополнительная информация

• Сертификат: ФСЗ 2009/03707.
• Назначение: бульон.