HiMedia M389-100G Минимальный бульон, Дэвис

Сухая питательная среда HiMedia M389-100G Минимальный бульон Дэвиса для изоляции и определения характеристик нутриентных мутантов Escherichia coli. Представляет собой химически определенную среду, содержащую минимальный набор питательных веществ, необходимых для роста штаммов дикого типа.

Принцип измерения и интерпретация

Минимальный бульон Дэвиса содержит только те питательные вещества, которые необходимы для роста штаммов Escherichia coli дикого типа. Нутриентные мутанты, полученные путем воздействия ультрафиолетового излучения на дикий тип, требуют для роста дополнительно вводимых компонентов (аминокислот, витаминов, нуклеиновых кислот).

Функции компонентов среды:

• Декстроз: источник энергии.
• Дикалийфосфат и монокалийфосфат: обеспечивают буферизацию среды.
• Сульфат магния и сульфат аммония: источники ионов, имитирующих метаболизм.

Для идентификации мутантов используют метод сравнения: суспензию облученных клеток культивируют на минимальном агаре (M512) с полным набором добавок. Отобранные колонии переносят в минимальный бульон Дэвиса как в чистом виде, так и с добавлением конкретных факторов роста. Рост в среде с добавками при отсутствии роста в чистом минимальном бульоне указывает на наличие мутации по данному конкретному фактору.

Состав

Состав, г/л:

Конечный pH (при 25 °C): 7,0 ± 0,2.

Методика приготовления и стерилизации

1. Растворить 11,6 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть до полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Тщательно перемешать и разлить по стерильным емкостям.

Технические характеристики

• Вес: 100 г
• Внешний вид: белый или кремовый гомогенный свободнотекучий порошок
• Цвет и прозрачность готовой среды: бесцветный прозрачный раствор
• pH 1,16% водного раствора (при 25 °C): 6,80–7,20

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре ниже 30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.