Лактозный бульон с лизином HiMedia M330-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда Лактозный бульон с лизином HiMedia M330-500G (уп/500 г) предназначена для определения лизиндекарбоксилазной активности у энтеробактерий, не ферментирующих лактозу. Применяется преимущественно для идентификации представителей рода Salmonella; сертификат ФСЗ 2009/03705.

Принцип измерения и интерпретация

Среда основана на методе Фалькоу (Falkow) для обнаружения лизиндекарбоксилазы у кишечных бацилл с помощью цветовой реакции.

Семейство Enterobacteriaceae представлено грамотрицательными факультативно-анаэробными неспорообразующими бактериями, которые хорошо растут на средах с пептоном и мясным экстрактом. Декарбоксилазы — это ферменты, которые удаляют молекулу CO₂ из аминокислоты с образованием щелочных аминов. Продуктом деградации лизина является кадаверин.

Многие неферментирующие микроорганизмы проявляют слабую декарбоксилазную активность или производят недостаточно аминов для изменения цвета индикатора. Для повышения чувствительности обнаружения рекомендуется использовать небольшое количество субстрата и массивную посевную дозу предварительно выращенных организмов с высокой концентрацией накопленных ферментов. Дополнительно чувствительность повышается при создании слоя вазелина толщиной 4 мм над поверхностью среды.

Интерпретация результатов:

• Первичная реакция: При наличии небольшого количества глюкозы в среде ферментирующие микроорганизмы вызывают накопление кислот, что приводит к изменению цвета среды на жёлтый. Неферментирующие микроорганизмы такую реакцию не дают.
• Конечная точка: Результат оценивается путем сравнения интенсивного щелочного пурпурного окрашивания с более светлым сине-пурпурным оттенком контрольных образцов.
• Механизм: Кишечные бациллы вырабатывают кислоту при первичной ферментации лактозы. Неферментирующие лактозу бактерии вырабатывают кислоту из декстрозы (жёлтый цвет), после чего L-лизин декарбоксилируется с образованием кадаверина. Это приводит к щелочной реакции, и бульон снова становится пурпурным.

Состав

Состав, г/л:

Методика приготовления и применения

1. Приготовление: Растворить 24,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды. При необходимости нагреть для полного растворения среды.
2. Розлив: Разлить по 5 мл в пробирки.
3. Стерилизация: Автоклавировать при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Посев: Использовать образцы пищевых продуктов или пробы воды, следуя соответствующим методикам сбора и обработки.
5. Инкубация: Инкубировать пробирки при 35 °C.
6. Оценка: Результаты считываются в течение 5 дней. Если через 5 суток реакция не проявилась, она интерпретируется как отрицательная.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 24 часов.

Технические характеристики

• Тип питательной среды: Диагностический бульон
• Внешний вид: Порошок от кремового до светло-зелёного цвета, однородный, свободно текучий
• Цвет и прозрачность готовой среды: Пурпурный прозрачный раствор без осадка
• pH (2,40% водного раствора при 25 °C): 6,8 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,60–7,00
• Происхождение компонентов: Животное
• Форма выпуска: Порошок
• Материал упаковки: ПНД (HDPE)

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: В плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, защищённом от экстремальных температур и источников возгорания.
• Хранение готовой среды: При температуре 15–25 °C.
• Особенности: Продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть во избежание образования комков.
• Утилизация: Использованные или непригодные препараты подлежат обязательному автоклавированию или сжиганию в соответствии с лабораторными правилами работы с инфекционными материалами.

Меры предосторожности

• Использовать средства индивидуальной защиты: защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.