Питательная диагностическая среда Лактозный бульон с лизином HiMedia M330-500G (уп/500 гр) — сухой бульон для выявления лизиндекарбоксилазной активности у энтеробактерий. Лактозный бульон с лизином HiMedia M330-500G применяется для анализа пищевых и водных образцов, а отрицательные реакции интерпретируют после инкубации при 35 °C в течение до 5 суток.

Назначение

Среда рекомендована для определения лизиндекарбоксилазной активности у представителей семейства Enterobacteriaceae, не ферментирующих лактозу, особенно у сальмонелл.

• Тип питательной среды: диагностическая
• Назначение изделия: бульон
• Тип образцов: пищевые образцы, образцы воды
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705

Идентификация продукта

Состав

Состав приведён в граммах на 1 л.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Пептон эквивалентен панкреатическому перевариванию желатина.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 24,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Разлейте среду по пробиркам порциями по 5 мл.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин и давлении 15 фунтов, что соответствует приблизительно 0,10 МПа.

Принцип действия и интерпретация

Семейство Enterobacteriaceae включает грамотрицательные факультативно-анаэробные неспорообразующие бактерии. Такие микроорганизмы хорошо растут на средах с пептоном и мясным экстрактом. На разработку сред для выявления, выделения и количественного определения представителей Enterobacteriaceae влияют дополнительные факторы.

Декарбоксилазы — ферменты, удаляющие молекулу CO₂ из аминокислоты с образованием аминов, обладающих щелочной реакцией. Кадаверин является продуктом расщепления лизина. Многие микроорганизмы, не ферментирующие соответствующие субстраты, проявляют только слабую декарбоксилазную активность и образуют недостаточное количество аминов для изменения системы индикатора pH. Чувствительность определения повышают за счёт использования небольшого количества субстрата и большого инокулюма предварительно выращенных микроорганизмов, в клетках которых уже накопилась высокая концентрация ферментов.

Нанесение поверх культуры слоя вазелина толщиной 4 мм повышает чувствительность выявления. Первичное окрашивание среды в жёлтый цвет вследствие накопления кислот, образующихся из небольшого количества глюкозы, наблюдается у ферментирующих микроорганизмов, но не у микроорганизмов, не ферментирующих лактозу. Конечные реакции оценивают сравнением интенсивной щелочной реакции с фиолетовым окрашиванием с более светлым голубовато-фиолетовым оттенком контрольных проб.

Перед интерпретацией отрицательной реакции пробирки необходимо инкубировать при 35 °C в течение до 5 суток.

Фальков сформулировал состав лизинового бульона, также называемого лизиновым бульоном Фалькова, для выявления лизиндекарбоксилазы у кишечных палочек по цветной реакции. Пептон из желатина и дрожжевой экстракт обеспечивают азотистые и углеродистые питательные вещества. Декстроза и лактоза являются сбраживаемыми сахарами. L-лизин служит субстратом, декарбоксилируемым под действием фермента декарбоксилазы. Бромкрезоловый пурпурный выполняет функцию индикатора pH.

Кишечные палочки образуют кислоту на начальной стадии ферментации лактозы. Микроорганизмы, не ферментирующие лактозу, образуют кислоту из декстрозы, что приводит к появлению жёлтой окраски. Затем L-лизин декарбоксилируется с образованием кадаверина, вызывающего щелочную реакцию; в результате бульон снова приобретает фиолетовую окраску.

Методика работы с образцами

Отбор и обращение с образцами

• Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.
• Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам и местным нормативам.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Контроль качества

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 24 ч.

• Соответствующие номера WDCM.

Рабочие характеристики

Пробирки необходимо инкубировать при 35 °C в течение до 5 суток перед интерпретацией реакций как отрицательных.

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно инструкции на этикетке и в пределах срока годности при хранении при рекомендованной температуре.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–25 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде в плотно закрытом флаконе для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Ограничения

Дополнительные ограничения применения приведены в отказе от ответственности на обороте.

Утилизация

Пользователь обязан