HiMedia M210I-500G BHI бульон

Микробиологическая сухая питательная среда HiMedia M210I-500G BHI бульон животного происхождения для обогащения патогенных кокков; конечный pH после стерилизации при 25 °C составляет 7,4 ± 0,2. HiMedia M210I-500G BHI бульон применяют для выявления и культивирования Staphylococcus aureus в пищевых, молочных образцах и кормах для животных; масса упаковки — 500 г, хранение — при 10–30 °C.

Назначение и область применения

Среда рекомендована для обогащения патогенных кокков, включая Staphylococcus aureus, в следующих образцах:

• пищевые продукты;
• корма для животных;
• молоко и молочные продукты.

Состав и критерии эффективности среды соответствуют требованиям ISO 6888-1:2021, ISO 8870:2006 и ISO 11133:2014 /Amd.2 :2020 (E), применяемым к соответствующим методам микробиологического анализа.

BHI-бульон также используют для:

• культивирования различных бактерий после внесения соответствующих добавок;
• приготовления инокулята для испытаний чувствительности микроорганизмов к противомикробным препаратам.

Принцип действия и интерпретация

Первоначальный бульон Brain Heart Infusion был разработан Rosenow путём добавления ткани мозга в декстрозный бульон. BHI-бульон представляет собой высокопитательную и хорошо буферированную среду, поддерживающую рост широкого спектра микроорганизмов. Среда рекомендована комитетом ISO для выявления Staphylococcus aureus.

Состав

Состав по спецификации ISO — Brain Heart Infusion Broth / BHI Broth:

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам эффективности.

• Пептон эквивалентен ферментативному гидролизату тканей животных.
• Сухие вещества настоя HM эквивалентны обезвоженному настою мозга телёнка.
• Порошок BHI эквивалентен обезвоженному настою сердца крупного рогатого скота.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 37,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Разлейте среду во флаконы или пробирки в соответствии с требуемым объёмом.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Для получения оптимальных результатов используйте среду в день приготовления. Если среда не используется в день приготовления, прокипятите её или обработайте паром в течение нескольких минут, затем охладите перед применением.

Образцы и пробоподготовка

Тип образцов

• Пищевые продукты и корма для животных.
• Молочные образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы обращения с пробами в соответствии с установленными руководствами.

Для молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Методика выявления Staphylococcus aureus

Обработка образцов

Метод обработки: ISO 8870 / IDF 83-2006.

Подготовка инокулята

1. Выделите типичную колонию на агаре Байрд—Паркера M043I.
2. Внесите выделенную колонию в BHI-бульон M210I.
3. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 24 ч ± 2 ч.

Подтверждение коагулазной реакцией

1. В асептических условиях внесите 0,1 мл каждой культуры из BHI-бульона M210I в 0,3 мл кроличьей плазмы.
2. Используйте стерильные гемолизные пробирки или флаконы.
3. Инкубируйте при 35–37 °C.
4. Проверьте образование сгустка в плазме через 4–6 ч инкубации.
5. Если результат отрицательный, повторно осмотрите пробу после 24 ч инкубации.
6. Коагулазную реакцию считают положительной, если объём сгустка составляет более половины первоначального объёма жидкости.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид порошка: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: раствор светло-янтарного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция и pH

Реакцию определяют для 3,7 % водного раствора по массе при 25 °C.

• Реакция: pH 7,4 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Обозначение *: соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

• Назначение изделия: бульон.
• Масса: 500 г.
• Конечный pH после стерилизации при 25 °C: 7,4 ± 0,2.
• Температура хранения: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–30 °C.

Условия хранения и срок годности

• Храните порошок при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Приготовленную среду храните при температуре 15–30 °C.
• Используйте продукт до истечения срока годности, указанного на этикетке.
• После вскрытия тщательно закрывайте флакон и храните продукт в сухом состоянии для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте ёмкость.
• Эффективность продукта сохраняется на оптимальном уровне при использовании в течение установленного срока годности.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед вскрытием упаковки ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковые характеристики роста на данной среде.
2. Каждая серия среды проверена на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). Для любого конкретного микроорганизма, не указанного в COA, пользователю рекомендуется провести валидацию среды с учётом индивидуальных требований к анализу.

Оценка эффективности

Ожидаемая эффективность среды обеспечивается при использовании в соответствии с инструкциями на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов продукта посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, соприкасавшиеся с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Стандарты и методики

Среда предназначена для применения в методиках, связанных с выявлением коагулазоположительных стафилококков, включая Staphylococcus aureus, и подготовкой культуральных сред:

• ISO 6888-1:2021;
• ISO 8870:2006;
• ISO 11133:2014 /Amd.2 :2020 (E);
• ISO 8870 / IDF 83-2006.

Техническое отличие BHI-бульона от универсальных питательных бульонов заключается в использовании компонентов настоя мозга и сердца, пептона, декстрозы и буферной системы гидрофосфата натрия при стандартизированном конечном pH 7,4 ± 0,2.