HiMedia M1930-500G ONPG бульон

Питательная микробиологическая среда HiMedia M1930-500G ONPG бульон — обезвоженный порошковый бульон для выявления активности β-галактозидазы. Среда применяется для дифференциации микроорганизмов, включая поздно ферментирующие лактозу штаммы; для подтверждения результата требуются дополнительные биохимические тесты.

Назначение

Среда рекомендована для дифференциации микроорганизмов на основании активности β-галактозидазы.

Тип образца

Выделенные микроорганизмы из клинических и не клинических образцов.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

▲ Casitose эквивалентен казеин-пептону.

Конечный pH при 25 °C: 7,5 ± 0,2.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 13,10 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте для полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте.
4. Разлейте приготовленную среду в пробирки или колбы в требуемом объёме.

Принцип действия и интерпретация

ONPG, или орто-нитрофенил-β-D-галактопиранозид, представляет собой синтетическое бесцветное соединение — галактозид, структурно сходное с лактозой.

Микроорганизмы, положительные по β-галактозидазе, расщепляют ONPG с образованием галактозы и о-нитрофенола — жёлтого соединения. Тест особенно полезен для быстрой идентификации скрытых ферментаторов лактозы, то есть микроорганизмов с поздней ферментацией лактозы.

Представителей семейства Enterobacteriaceae обычно группируют по способности ферментировать лактозу, поэтому ONPG-тест имеет диагностическое значение для этой группы микроорганизмов.

ONPG-бульон используется для дифференциации микроорганизмов по способности утилизировать ONPG, структурно сходный с лактозой. Для выявления ферментации лактозы в стандартном тесте необходимы два фермента:

• пермеаза облегчает проникновение молекул лактозы в бактериальную клетку;
• β-галактозидаза гидролизует лактозу с образованием глюкозы и галактозы.

Истинные неферментирующие лактозу микроорганизмы не имеют ни одного из этих ферментов. Некоторые микроорганизмы не имеют пермеазы, но обладают β-галактозидазой; такие микроорганизмы относятся к поздним ферментаторам лактозы.

Функции компонентов среды:

• Casitose служит источником азотсодержащих соединений, аминокислот с длинной цепью и других факторов роста;
• фосфат выполняет буферную функцию;
• хлорид натрия поддерживает осмотический баланс;
• орто-нитрофенил-β-D-галактопиранозид служит субстратом для выявления фермента β-галактозидазы.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения метода

1. Некоторые микроорганизмы могут ферментировать лактозу с задержкой, поэтому требуется дополнительная инкубация.
2. Для подтверждения результата необходимо выполнить другие биохимические тесты.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с указаниями на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид: однородный, сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор светло-янтарного цвета в пробирках.

Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 1,3 % (масса/объём) при 25 °C; pH 7,5 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,30–7,70.

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

Обозначения:

• * — соответствующие номера WDCM;
• # — ранее обозначался как Enterobacter aerogenes;
• ## — ранее обозначался как Proteus vulgaris.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

Храните сухую и приготовленную среду при температуре 2–8 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия контейнер необходимо плотно закрыть и хранить в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности продукта. Неправильное хранение может привести к образованию комков.

Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов среды посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Техническое отличие методики

В отличие от стандартного теста ферментации лактозы, ONPG-тест выявляет β-галактозидазную активность без обязательного наличия пермеазы и позволяет идентифицировать микроорганизмы с поздней ферментацией лактозы.