HiMedia M1930-500G ONPG бульон

Сухая питательная среда HiMedia M1930-500G ONPG бульон для дифференциации микроорганизмов на основе активности бета-галактозидазы. Применяется для быстрой идентификации «скрытых» ферментеров лактозы (поздних ферментеров), в частности представителей семейства Enterobacteriaceae.

Принцип измерения

Бульон ONPG используется для разделения микроорганизмов по их способности утилизировать орто-нитрофенил-β-D-галактопиранозид (ONPG) — синтетическое бесцветное соединение (галактозид), структурно схожее с лактозой.

Для демонстрации ферментации лактозы в традиционных тестах требуются два фермента:

1. Пермеаза — облегчает проникновение молекул лактозы в бактериальную клетку.
2. β-галактозидаза — гидролизует лактозу с образованием глюкозы и галактозы.

Истинные неферментеры лактозы лишены обоих ферментов. Однако некоторые организмы не обладают пермеазой, но имеют β-галактозидазу; такие микроорганизмы являются поздними ферментерами лактозы. β-галактозидаза-положительные организмы расщепляют ONPG до галактозы и о-нитрофенола, который представляет собой жёлтое соединение.

Состав

Состав, г/л:

Конечный pH (при 25 °C): 7,5 ± 0,2.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 13,10 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте для полного растворения среды.
3. ЗАПРЕЩЕНО АВТОКЛАВИРОВАТЬ.
4. Разлейте среду в пробирки или колбы согласно требованиям анализа.

Работа с образцами

• Тип образца: изолированные микроорганизмы из клинических и неклинических проб.
• Обработка: при работе с клиническими образцами следует соблюдать установленные руководства по обращению с биоматериалами. После использования загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный прозрачный раствор.
• Реакция: pH 1,3% (масса/объём) водного раствора при 25 °C составляет 7,5 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,30–7,70.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

Ограничения и предостережения

• Некоторые организмы могут демонстрировать задержку ферментации лактозы, что требует более длительной инкубации.
• Для окончательного подтверждения результатов необходимо проведение других биохимических тестов.
• Только для диагностики in vitro и профессионального использования.
• При работе использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: сухую и приготовленную среду хранить при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть для предотвращения образования комков.
• Место хранения: сухое вентилируемое помещение, защищённое от экстремальных температур и источников возгорания.
• Утилизация: отработанные среды и материалы, контактировавшие с клиническими пробами, подлежат обеззараживанию путем автоклавирования или инсинерации.