HiMedia M1930-100G ONPG бульон

Дифференциальная питательная среда HiMedia M1930-100G ONPG бульон для определения активности бета-галактозидазы у микроорганизмов. Применяется для быстрой идентификации «скрытых» ферментаторов лактозы (поздних ферментаторов) в семействе Enterobacteriaceae; вес упаковки составляет 100 г.

Принцип измерения

Определение основано на способности микроорганизмов расщеплять ONPG (орто-нитрофенил-бета-D-галактопиранозид) — синтетическое бесцветное соединение (галактозид), структурно схожее с лактозой.

Для демонстрации ферментации лактозы в традиционных тестах требуются два фермента:

1. Пермеаза — облегчает проникновение молекул лактозы в бактериальную клетку.
2. $\beta$-галактозидаза — гидролизует лактозу с образованием глюкозы и галактозы.

Истинные неферментаторы лактозы лишены обоих ферментов. Однако некоторые организмы не имеют пермеазы, но обладают $\beta$-галактозидазой; такие микроорганизмы являются поздними ферментаторами лактозы. $\beta$-галактозидаза-положительные организмы расщепляют ONPG до галактозы и о-нитрофенола, который представляет собой жёлтое соединение.

Состав

Состав, г/л:

Значение pH при 25 °C: 7,5 $\pm$ 0,2.

Методика приготовления и применения

Приготовление среды

1. Суспендируйте 13,10 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте для полного растворения среды.
3. ЗАПРЕЩЕНО АВТОКЛАВИРОВАТЬ.
4. Разлейте в пробирки или колбы согласно необходимости.

Процедура анализа

Среда используется для дифференциации изолированных микроорганизмов из клинических и неклинических образцов. При работе с клиническим материалом следует соблюдать установленные инструкции по обращению с биообразцами.

Интерпретация результатов и контроль качества

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный прозрачный раствор.
• Реакция: pH 1,3% (масс./об.) водного раствора при 25 °C составляет 7,5 $\pm$ 0,2.
• Диапазон pH: 7,30–7,70.

Технические характеристики

• Назначение изделия: Бульон
• Вес: 100 г

Ограничения и предостережения

• Некоторые организмы могут демонстрировать задержку в ферментации лактозы, что требует более длительной инкубации.
• Для окончательного подтверждения результатов необходимо проведение других биохимических тестов.
• Только для диагностики in vitro и профессионального использования.
• При работе использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: сухую и приготовленную среду хранить при температуре 2–8 °C.
• Требования к хранению: после вскрытия плотно закрывать бутылку для предотвращения комкования из-за гигроскопичности продукта. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Утилизация: использованные или непригодные препараты должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации.