Микробиологическая питательная среда HiMedia M1901-100G DEV «Триптофановый бульон» — сухой порошковый бульон для бактериологического исследования воды и определения индолообразования. Применяется для субкультивирования колиформных бактерий и их дифференциации; среда общего назначения может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.

Назначение и область применения

Триптофановый бульон рекомендован для:

• субкультивирования колиформных бактерий;
• дифференциации бактерий;
• определения продукции индола при бактериологическом исследовании воды.

Тип образца: пробы воды.

Состав

Содержание компонентов приведено в граммах на 1 л среды:

Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности. Пептон HM эквивалентен мясному пептону.

Принцип действия и интерпретация

Триптофановый бульон применяется для выявления продукции индола колиформными бактериями. Определение продукции индола является важным признаком дифференциации бактерий.

Метод основан на способности некоторых бактерий разлагать аминокислоту триптофан с образованием индола, который накапливается в питательной среде. Расщепление триптофана отдельными микроорганизмами происходит при участии фермента триптофаназы, обеспечивающей образование индола за счёт гидролитической активности.

Образовавшийся индол выявляют с помощью реактива Ковача или реактива Эрлиха. Индол взаимодействует с альдегидом, содержащимся в реактиве, с образованием красного окрашивания в спиртовом слое. Спиртовой слой экстрагирует и концентрирует красный окрашенный комплекс.

Компоненты среды выполняют следующие функции:

• пептон HM обеспечивает нетребовательные микроорганизмы необходимыми источниками азота и углерода, витаминами, факторами роста и микроэлементами;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды;
• DL-триптофан является аминокислотой и субстратом для исследования реакции образования индола.

Для полной идентификации микроорганизмов требуется дополнительное биохимическое подтверждение.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 16 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте приготовленную среду в автоклаве при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Тщательно перемешайте среду.
5. Разлейте среду в пробирки или колбы в необходимом объёме.

Отбор и обращение с образцами

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно действующим руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид сухой среды: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: светло-жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий раствор.

Реакция: реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 1,6 % при 25 °C.

pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее использовавшееся название: Enterobacter aerogenes.

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Ограничения применения

Среда является средой общего назначения и может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–25 °C.
• Храните продукт в плотно закрытом контейнере.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия плотно закрывайте флакон и храните продукт в сухом состоянии для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

Отличие методики

В отличие от питательных сред общего назначения без специализированного субстрата, состав содержит DL-триптофан, что позволяет использовать среду для выявления реакции образования индола с последующей обработкой реактивом Ковача или реактивом Эрлиха.