HiMedia M1875-500G Триптон-соевый бульон с сульфатом железа

Сухая питательная среда HiMedia M1875-500G Триптон-соевый бульон с сульфатом железа предназначена для изоляции видов Salmonella из пищевых продуктов. Применяется для предварительного обогащения проб яиц в соответствии с методикой FDA BAM; содержит сульфат железа для стимуляции роста поврежденных штаммов сальмонелл.

Область применения

Среда рекомендуется для выделения видов Salmonella из образцов пищевых продуктов и молочной продукции. Основная задача — предварительное обогащение проб сырых яиц, где уровень контаминации может быть низким, что требует увеличения числа клеток в течение нескольких дней.

Принцип измерения

Триптон и соевый пептон служат источниками азота, длинноцепочечных аминокислот и витаминов. Глюкоза (декстроза) выступает в качестве источника углерода. Хлорид натрия (NaCl) поддерживает осмотический баланс, а фосфат выполняет роль буферного агента. Сульфат железа способствует восстановлению и росту поврежденных штаммов Salmonella.

Методика проведения анализа

1. Подготовка образца: Дезинфицируйте яйца раствором 70 % алкоголя и 5 % раствора йода/йодида калия в соотношении 3:1.
2. Гомогенизация: Асептически разбейте яйца, тщательно перемешайте содержимое до полного смешивания желтков с белком.
3. Первичная инкубация: Инкубируйте смесь при комнатной температуре (20–24 °C) в течение 96 ± 2 ч.
4. Обогащение: Через 96 ± 2 ч отберите 25 мл смеси и добавьте в 225 мл подготовленного триптон-соевого бульона с сульфатом железа (M1875).
5. Вторая инкубация: Инкубируйте пробу в течение 24 ± 2 ч при температуре 35 °C.
6. Посев:
   • Перенесите 0,1 мл смеси в 10 мл среды Раппапорта-Вассилиадиса (M880F).
   • Перенесите 1 мл смеси в 10 мл тетратионатного бульона (M032F).
7. Финальный этап: После перемешивания на вортексе инкубируйте среды при оптимальной температуре в течение 24 ± 2 ч. Затем проведите пересев на агар XLD (M031F) или гектоэно-энтерический агар (M467F).
8. Интерпретация: Инкубируйте чашки 24 ± 2 ч при 35 °C. Типичные колонии сальмонелл на агаре XLD имеют сине-зелёный или синий цвет; на HE-агаре — розовый цвет с чёрными центрами или без них.

Приготовление и стерилизация

1. Растворите 30,03 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте раствор до полного растворения среды.
3. Разлейте по пробиркам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечный pH (при 25 °C): 7,3 ± 0,2
• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до жёлтого цвета
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-жёлтый прозрачный раствор (допускаются незначительные частицы)
• Диапазон pH: 7,10–7,50

Дополнительные параметры:

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 15–25 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и меры предосторожности

• Для окончательной идентификации микроорганизмов необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте стандартные правила микробиологической безопасности: используйте защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Контаминированные материалы перед утилизацией подлежат обязательному автоклавированию или сжиганию.