HiMedia M1875-500G Триптон-соевый бульон с сульфатом железа

Питательная микробиологическая среда HiMedia M1875-500G Триптон-соевый бульон с сульфатом железа представляет собой сухой порошковый препарат для приготовления бульона. Среда применяется для предварительного обогащения и выделения бактерий рода Salmonella из пищевых и молочных образцов; для окончательной идентификации необходимы дополнительные биохимические и серологические тесты.

Назначение

Среда рекомендована для выделения бактерий рода Salmonella из пищевых образцов, включая образцы яиц, в соответствии с бактериологическим аналитическим руководством FDA 1998 года (FDA BAM). Тип образца: пищевые и молочные продукты.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных параметров эффективности.

Технические характеристики

Принцип действия и интерпретация

Триптон-соевый бульон с сульфатом железа используют для предварительного обогащения бактерий рода Salmonella при выделении микроорганизмов из образцов яиц в соответствии с FDA BAM.

Бактерии рода Salmonella относятся к наиболее таксономически сложным группам семейства Enterobacteriaceae. Инфицирование человека бактериями рода Salmonella чаще всего связано с употреблением пищевых продуктов, воды или молока, загрязнённых человеческими или животными экскрементами. Источниками пищевого сальмонеллёза также могут быть загрязнённые яйца и продукты, содержащие яйца; значительная доля таких вспышек связана с Salmonella Enteritidis.

Уровень загрязнения отдельных яиц или объединённой пробы яиц может быть низким, поэтому для увеличения числа клеток этап обогащения может занимать несколько суток. Предварительное обогащение сырых измельчённых яиц в среде с добавлением сульфата железа значительно усиливает рост бактерий рода Salmonella.

Триптон и соевый пептон обеспечивают источник азота, длинноцепочечных аминокислот и витаминов. Глюкоза служит источником углерода, хлорид натрия поддерживает осмотический баланс, а фосфат выполняет функцию буферного компонента. Сульфат железа способствует восстановлению повреждённых штаммов Salmonella.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 30,03 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Распределите приготовленную среду по пробиркам.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (примерно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.

Методика выделения Salmonella из образцов яиц

1. Продезинфицируйте яйца раствором, состоящим из 3 частей 70%-ного спирта и 1 части 5%-ного раствора йода/йодида калия.
2. В стерильных перчатках вскройте яйца асептически.
3. Тщательно перемешайте образцы до полного смешивания желтков с белком.
4. Инкубируйте объединённую пробу при комнатной температуре 20–24 °C в течение 96 ± 2 ч.
5. После инкубации отберите 25 мл полученной смеси и внесите в 225 мл триптон-соевого бульона с сульфатом железа M1875.
6. Инкубируйте среду в течение 24 ± 2 ч при 35 °C.
7. Перенесите 0,1 мл смеси в 10 мл среды Раппапорта–Вассилиадиса M880F.
8. Отдельно перенесите 1 мл смеси в 10 мл тетратионатного бульона M032F.
9. Перемешайте пробы на вихревом смесителе.
10. Инкубируйте среды в течение 24 ± 2 ч при оптимальной температуре, выбранной с учётом микробной обсеменённости и типа образца.
11. Выполните дальнейший пересев на ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар (XLD) M031F или агар Хектоэна (HE) M467F.
12. Инкубируйте чашки в течение 24 ± 2 ч при 35 °C.
13. Оцените появление типичных колоний сальмонелл: на агаре XLD образуются сине-зелёные или синие колонии, на агаре HE — розовые колонии с чёрными центрами или без них.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам лаборатории. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид порошка: однородный свободно текущий порошок кремового или жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Приготовленная среда: прозрачный раствор светло-жёлтого цвета; допускается наличие небольшого количества частиц.

Реакция среды

Реакция 3,0%-ного водного раствора, измеренная при 25 °C: pH 7,3 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

Для окончательной идентификации микроорганизмов необходимо выполнить дополнительные биохимические и серологические тесты.

Условия хранения и срок годности

• Хранение сухого препарата: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение приготовленной среды: при температуре 15–25 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия: хранить препарат в сухом виде, плотно закрыв флакон.
• Требования к помещению: сухое проветриваемое место, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Гигроскопичность порошка может привести к образованию комков; неправильное хранение повышает вероятность их формирования.
• Для сохранения рабочих характеристик препарат следует использовать в пределах установленного срока годности.

Меры предосторожности

Перед открытием контейнера прочитайте маркировку. При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдайте надлежащие правила микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и культурами. При работе с образцами соблюдайте