HiMedia M1850-500G Модифицированный HiColiform бульон

Модифицированный HiColiform бульон HiMedia M1850-500G — селективная питательная среда для обнаружения и подтверждения Escherichia coli и общих колиформ в пробах воды. Состав включает комбинацию хромогенных и флуорогенных субстратов для дифференциации микроорганизмов.

Принцип измерения и интерпретация результатов

Среда разработана для идентификации Escherichia coli и общих колиформ в пробах воды. Дифференциация основана на следующих механизмах:

• Общие колиформы: наличие указывается сине-зелёным окрашиванием среды вследствие расщепления хромогенного субстрата.
• Escherichia coli: отличается от других колиформ способностью флуоресцировать в присутствии флуорогенного субстрата. Фермент $\beta$-глюкуронидаза, характерный для E. coli, расщепляет субстрат, что вызывает появление синей флуоресценции при облучении ультрафиолетовым (УФ) светом.
• Усиление реакции: изопропил-$\beta$-D-галактопиранозид (IPTG) усиливает синтез ферментов и повышает активность $\beta$-галактозидазы.

Роль компонентов:

• Пептон: источник углерода, азота, длинноцепочечных аминокислот и витаминов; необходим для одновременного определения продукции индола.
• Фосфатные соли: обеспечивают буферную емкость для быстрого роста колиформ.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.
• Лаурилсульфат натрия (SLS): обеспечивает селективность среды, подавляя рост сопутствующей микрофлоры, особенно грамположительных организмов.

Состав

Состав, г/л:

Значение pH (при 25 °C): 6,8 $\pm$ 0,2.

Методика приготовления и стерилизации

1. Суспендируйте 17,4 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте раствор до полного растворения компонентов.
3. Тщательно перемешайте и разлейте по пробиркам или колбам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа) в течение 15 минут.

Область применения и работа с образцами

Среда предназначена для анализа проб воды. Сбор и обработка образцов должны проводиться в соответствии с действующими руководствами и местными стандартами.

Ограничения метода

• $\beta$-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E. coli; отдельные штаммы могут давать отрицательную реакцию.
• Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост из-за вариаций в питательных потребностях.

Контроль качества

Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до жёлтого цвета. Цвет и прозрачность готовой среды: светло-жёлтый раствор, от прозрачного до слегка опалесцирующего. Реакция: pH 1,74 % (масса/объём) водного раствора при 25 °C составляет 6,8 $\pm$ 0,2. Диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Технические характеристики

• Назначение: Бульон для обнаружения колиформ и E. coli
• Масса нетто: 500 г
• Температура хранения (порошок): 15–25 °C
• Температура хранения (готовая среда): 2–8 °C
• Температура инкубации: 35–37 °C

Условия эксплуатации и хранения

Хранить в плотно закрытом контейнере в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников возгорания. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты, а также материалы, контактировавшие с клиническими образцами, подлежат обеззараживанию путем автоклавирования или инсинерации в соответствии с установленными лабораторными процедурами.