HiMedia M1789-500G PYR бульон

Питательная среда HiMedia M1789-500G PYR бульон представляет собой порошковую среду для выделения и идентификации Streptococcus pyogenes. Применяется для предполагаемого выявления стрептококков по гидролизу PYR; конечный pH среды составляет 7,8 ± 0,2.

Назначение и область применения

PYR-бульон используется для выделения и идентификации Streptococcus pyogenes. Среда предназначена для предполагаемого выявления и идентификации S. pyogenes по гидролизу PYR.

PYR-тест является предварительным тестом для стрептококков группы A и группы D, относящихся к энтерококковым стрептококкам. Метод применяют для определения активности фермента L-пирролидонилариламидазы (PYR), который продуцируется Streptococcus pyogenes, но не продуцируется другими β-гемолитическими стрептококками.

Состав

Содержание компонентов указано в граммах на 1 л среды.

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Принцип измерения и интерпретация

PYR-тест определяет активность фермента L-пирролидонилариламидазы (PYR), вырабатываемого Streptococcus pyogenes. Хромогенная смесь содержит субстрат для фермента PYR. При гидролизе субстрата S. pyogenes образуются L-пирролидон и β-нафтиламин.

Свободный β-нафтиламин выявляют добавлением диазокрасочного комплекса N,N-диметиламиноциннамальдегида. PYR-реагент взаимодействует с β-нафтиламином с образованием красного основания Шиффа. Появление красного окрашивания указывает на положительную реакцию гидролиза PYR.

После инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч одну каплю PYR-реагента непосредственно наносят на предполагаемый поверхностный рост на чашке. Изменение окраски оценивают через 2 мин.

PYR-тест заменяет тесты с бацитрацином и на устойчивость к соли, основанные на росте в среде с 6,5 % NaCl.

Основа бульона Тодда—Хьюитта (M313) служит базовой средой, в которую добавляют субстрат для фермента PYR.

Функции компонентов среды:

• настой из сердца крупного рогатого скота и пептический перевар животной ткани обеспечивают азотистое питание;
• декстроза является углеводом и источником энергии;
• динатрийфосфат выполняет функцию буферного компонента;
• хлорид натрия поддерживает осмотический баланс;
• хромогенная смесь содержит субстрат для фермента PYR.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 37 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Тщательно перемешайте.
4. Разлейте среду в соответствии с требуемым объёмом.
5. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм — примерно 0,10 МПа — и температуре 121 °C в течение 15 мин.

Методика проведения PYR-теста

1. Инкубируйте подготовленную среду при 35–37 °C в течение 18–24 ч.
2. Нанесите 1 каплю PYR-реагента непосредственно на предполагаемый поверхностный рост на чашке.
3. Через 2 мин оцените изменение окраски.
4. Красное окрашивание трактуется как положительная реакция гидролиза PYR; отсутствие положительного красного окрашивания — как отрицательная реакция.

Контроль качества

Внешний вид

Кремовый или жёлтый однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор светло-жёлтого цвета.

Реакция среды

Реакция 3,7 % (масс./об.) водного раствора при 25 °C: pH 7,8 ± 0,2.

Контролируемый диапазон pH

pH: 7,60–8,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч. PYR определяют после добавления PYR-реагента R044.

Технические характеристики

• Назначение изделия: бульон
• Масса: 500 г
• Конечный pH при 25 °C: 7,8 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,60–8,00

Хранение и срок годности

• Условия хранения сухой среды: 2–8 °C
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Требования к упаковке при хранении: плотно закрытый контейнер
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке

Техническое отличие методики

В отличие от тестов с бацитрацином и на устойчивость к соли, PYR-тест основан на выявлении активности L-пирролидонилариламидазы с помощью хромогенного субстрата и образования красного окрашивания после добавления PYR-реагента.