HiMedia M1786I-500G Селективный бульон для Cronobacter (CSB)

Питательная микробиологическая среда HiMedia M1786I-500G Селективный бульон для Cronobacter (CSB) представляет собой порошок для приготовления селективного бульона с конечным pH 7,4 ± 0,2. Применяется для скрининга Cronobacter в пищевых образцах с последующим выделением предположительных колоний на агаре CCI; масса упаковки составляет 500 г.

Назначение

Селективный бульон HiMedia M1786I-500G рекомендован для скрининга Cronobacter (ранее Enterobacter sakazakii) в пищевых продуктах. Состав и рабочие характеристики среды соответствуют требованиям ISO 22964:2017(E), установленным для обнаружения Cronobacter в пищевой цепи.

Тип образца: пищевые продукты.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды:

Примечание: формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров. Экстракт HM эквивалентен мясному экстракту.

Селективная добавка FD233 Van10

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 28,04 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте раствор для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте содержимое одного флакона селективной добавки Van10 FD233.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте по 10 мл в стерильные пробирки.

Принцип действия и интерпретация

Cronobacter — грамотрицательные палочковидные представители семейства Enterobacteriaceae, связанные со вспышками заболеваний, вызывающих сепсис, менингит и некротизирующий энтероколит. Представители рода Cronobacter также выделялись из сухих детских молочных смесей; высокая устойчивость к высушиванию обеспечивает этим микроорганизмам конкурентное преимущество в сухих средах и повышает риск контаминации.

Бульон для скрининга Cronobacter разработан на основе методики Iversen и соавторов. Селективный бульон для Cronobacter рекомендован комитетом ISO для выделения представителей рода Cronobacter из пищевых образцов.

Функции компонентов среды:

• пептон и экстракт HM обеспечивают углеродное, азотное питание и факторы роста;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие;
• сахароза служит ферментируемым углеводом;
• бромкрезоловый пурпурный используется как индикатор.

Cronobacter ферментирует сахарозу, вследствие чего после инкубации бульон приобретает жёлтую окраску.

Пробоподготовка и проведение анализа

Тестовая навеска

Для приготовления первичного разведения внесите 10 г или 10 мл исследуемого образца в 90 мл среды предварительного обогащения — буферной пептонной воды (BPW).

Предварительное обогащение

Инкубируйте засеянную среду предварительного обогащения при температуре 34–38 °C в течение 18 ч ± 2 ч.

Обогащение в CSB

После инкубации засеянной среды предварительного обогащения тщательно перемешайте культуру. Перенесите 0,1 мл полученной культуры в 10 мл селективного бульона для Cronobacter (CSB) и тщательно перемешайте. Инкубируйте при температуре 41,5 °C в течение 24 ч ± 2 ч.

Выделение предположительных представителей Cronobacter spp.

Из обогащённой культуры внесите 10 мкл на поверхность агара для выделения Cronobacter CCI. Инкубируйте при температуре 41,5 °C в течение 24 ч ± 2 ч.

Подтверждение

Для подтверждения выполняют биохимические тесты.

Контроль качества

Внешний вид порошка: однородный, сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в пробирках образуется прозрачный раствор фиолетового цвета.

Реакция: реакция водного раствора концентрацией 2,8 % масс./об. при 25 °C; pH 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации среды с добавленной селективной добавкой Van10 FD233 при температуре 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч. После этого бульон высевают на агар для выделения Cronobacter HiCrome™ (агар CCI, M2062I) и инкубируют при температуре 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытой ёмкости.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–30 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде; плотно закрывайте флакон для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом, вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте ёмкость.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и соблюдении рекомендованных условий хранения.

Ограничения применения

1. Отдельные микроорганизмы отличаются требованиями к условиям роста и могут демонстрировать на среде различные варианты роста.
2. Каждая серия среды проверяется на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). При необходимости применения среды для конкретного микроорганизма, не указанного в COA, пользователю рекомендуется самостоятельно валидировать среду с учётом специфических требований.

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах установленного срока годности и при хранении в рекомендованном температурном диапазоне.

Меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории при обращении с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• При необходимости обращайтесь к требованиям безопасности, приведённым в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в