HiMedia M1786I-500G Селективный бульон для Cronobacter (CSB)

Селективный бульон для Cronobacter (CSB) HiMedia M1786I-500G предназначен для скрининга бактерий рода Cronobacter (ранее Enterobacter sakazakii) в пищевых продуктах. Состав и рабочие характеристики среды соответствуют спецификациям стандарта ISO 22964:2017(E).

Принцип измерения и интерпретация

Бактерии Cronobacter (ранее Enterobacter sakazakii) представляют собой грамотрицательные палочковидные представители семейства Enterobacteriaceae, вызывающие сепсис, менингит и некротизирующий энтероколит. Данный вид часто выделяют из сухих детских смесей, так как высокая устойчивость к высыханию дает им конкурентное преимущество в сухих средах.

В составе среды пептон и экстракт HM обеспечивают необходимые углеродные, азотистые и питательные вещества для роста. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс. Сахароза служит ферментируемым углеводом, а бромкрезоловый пурпурный выступает в роли индикатора. Cronobacter ферментируют сахарозу, в результате чего после инкубации бульон окрашивается в жёлтый цвет.

Методика проведения анализа

Подготовка пробы

Для приготовления первичного разведения добавьте 10 г или 10 мл исследуемого образца в 90 мл среды для предварительного обогащения (например, фосфатно-солевого бульона BPW).

Предварительное обогащение

Инкубируйте инокулированную среду для предварительного обогащения при температуре 34–38 °C в течение 18 ± 2 ч.

Обогащение

После инкубации тщательно перемешайте культуру и перенесите 0,1 мл полученного раствора в 10 мл селективного бульона CSB. Инкубируйте при температуре 41,5 °C в течение 24 ± 2 ч.

Изоляция предполагаемых Cronobacter spp.

Из культуры обогащения инокулируйте 10 мкл на поверхность агара CCI (HiCrome™ Cronobacter Isolation Agar). Инкубируйте при температуре 41,5 °C в течение 24 ± 2 ч.

Подтверждение

Для окончательного подтверждения проводят биохимические тесты.

Приготовление и стерилизация

1. Суспендируйте 28,04 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте содержимое 1 флакона селективной добавки Van10 (FD233).
6. Тщательно перемешайте и разлейте по 10 мл в стерильные пробирки.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Конечный pH (при 25 °C): 7,4 ± 0,2

Селективная добавка FD233 Van10

Общие параметры

• Происхождение компонентов: животное
• Физическая форма: порошок
• Цвет и вид порошка: от кремового до жёлтого, однородный свободнотекущий порошок
• Вид готовой среды: прозрачный раствор пурпурного цвета
• Диапазон pH: 7,20–7,60
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)
• Вес: 500 г

Контроль качества и культуральные характеристики

Характеристики определены с добавлением селективной добавки Van10 (FD233) после инкубации при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч. Повторный посев выполнен на агар HiCrome™ Cronobacter Isolation Agar (CCI Agar) (M2062I) с инкубацией при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч.

*Соответствующие номера WDCM.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 15–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников возгорания.

Ограничения и меры предосторожности

• Индивидуальные микроорганизмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативность паттернов на данной среде.
• Рекомендуется проводить валидацию среды для конкретных микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа (COA), исходя из уникальных требований пользователя.
• При работе с образцами и культурами следует соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, защитная одежда, защита глаз и лица).