Питательная микробиологическая среда HiMedia M1786I-100G Селективный бульон для Cronobacter (CSB) — порошковый бульон массой 100 г. Среда предназначена для скрининга Cronobacter в пищевых продуктах; хранение осуществляется при 10–30 °C в плотно закрытой таре.

Назначение

Селективный бульон для скрининга Cronobacter (ранее Enterobacter sakazakii) в образцах пищевых продуктов. Состав и рабочие характеристики среды соответствуют требованиям ISO 22964:2017(E).

Состав

Состав среды на 1 л:

Экстракт HM эквивалентен мясному экстракту.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Селективная добавка FD233 Van10

Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2.

Принцип действия и интерпретация

Cronobacter (ранее Enterobacter sakazakii) — грамотрицательные палочковидные представители семейства Enterobacteriaceae, связанные со вспышками заболеваний, вызывающих сепсис, менингит и некротизирующий энтероколит.

Виды Cronobacter также выделяли из сухих детских молочных смесей. Высокая устойчивость к высушиванию обеспечивает этим микроорганизмам конкурентное преимущество в сухой среде и повышает риск контаминации.

Бульон для скрининга Cronobacter разработан Iversen и соавторами. Селективный бульон для Cronobacter рекомендован комитетом ISO для выделения видов Cronobacter из образцов пищевых продуктов.

• Пептон и экстракт HM обеспечивают углеродистые, азотистые и ростовые питательные вещества.
• Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.
• Сахароза является сбраживаемым углеводом.
• Бромкрезоловый пурпурный используется как индикатор.
• Cronobacter сбраживает сахарозу, вследствие чего после инкубации бульон приобретает жёлтую окраску.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 28,04 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов силы на кв. дюйм (≈0,103 МПа) при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях внесите содержимое одного флакона селективной добавки Van10 FD233.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте по 10 мл в стерильные пробирки.

Тип образца

• Образцы пищевых продуктов.

Отбор и подготовка образцов

Аналитическая навеска

Для приготовления первичного разведения внесите 10 г или 10 мл исследуемого образца в 90 мл среды предварительного обогащения — буферной пептонной воды (BPW).

Предварительное обогащение

Инкубируйте инокулированную среду предварительного обогащения при температуре 34–38 °C в течение 18 ч ± 2 ч.

Обогащение

После инкубации инокулированной среды предварительного обогащения тщательно перемешайте её, перенесите 0,1 мл полученной культуры в 10 мл селективного бульона для Cronobacter (CSB) и тщательно перемешайте. Инкубируйте при 41,5 °C в течение 24 ч ± 2 ч.

Выделение предположительно положительных культур Cronobacter spp.

Из обогатительной культуры нанесите 10 мкл на поверхность агара для выделения Cronobacter HiCrome™ (агар CCI). Инкубируйте при 41,5 °C в течение 24 ч ± 2 ч.

Подтверждение

Для подтверждения проводят биохимические тесты.

Контроль качества

Внешний вид

Кремовый или жёлтый однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках образуется прозрачный раствор фиолетового цвета.

Реакция среды

Реакция водного раствора концентрацией 2,8 % м/об при 25 °C: pH 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации среды с добавленной селективной добавкой Van10 FD233 при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч. После этого бульон высевают на агар для выделения Cronobacter HiCrome™ (агар CCI) M2062I и инкубируют при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

• Храните сухую среду при 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Приготовленную среду храните при 15–30 °C.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия тщательно закройте флакон и храните продукт в сухом виде.
• Из-за гигроскопичности продукта необходимо предотвращать образование комков.
• Неправильное хранение может привести к комкованию порошка.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и соблюдении рекомендованных условий хранения.

Безопасность и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты