HiMedia M1713-500G HiCrome M-TEC бульон

Питательная хромогенная среда HiMedia M1713-500G HiCrome M-TEC бульон производства HiMedia в форме порошка массой 500 г. Среда предназначена для дифференциации и количественного определения термотолерантных E. coli в воде методом мембранной фильтрации с образованием пурпурно-фиолетовых колоний.

Назначение

HiCrome M-TEC бульон применяют для дифференциации и количественного определения термотолерантных E. coli в пробах воды методом мембранной фильтрации.

• Тип образца: пробы воды
• Назначение изделия: бульон, хромогенная питательная среда
• Форма выпуска: порошок
• Происхождение: животное
• Упаковка: HDPE (полиэтилен высокой плотности)
• Масса: 500 г

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих параметров.

• Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2
• Тип продукта: HiCrome™

Принцип измерения и интерпретация

HiCrome M-TEC бульон представляет собой хромогенную среду для обнаружения и количественного определения термотолерантных E. coli (TEC) в воде методом мембранной фильтрации. Среда является модификацией агара M-TEC, разработанного Dufour.

В состав модифицированной среды входит хромоген 5-бром-6-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронид. Фермент β-D-глюкуронидаза, образуемый штаммами E. coli, расщепляет хромоген с образованием глюкуроновой кислоты. В результате колонии E. coli приобретают пурпурно-фиолетовую окраску.

Функции компонентов среды:

• Протеозный пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают источник углерода и азота, длинноцепочечных аминокислот, витаминов и необходимых питательных веществ.
• Лактоза является сбраживаемым углеводом.
• Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.
• Дигидрофосфат калия и гидрофосфат калия, двухзамещённый, образуют буферную систему, регулирующую pH при ферментативных процессах.
• Лаурилсульфат натрия и дезоксихолат натрия повышают селективность среды за счёт ингибирования грамположительных бактерий.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 30,6 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду в автоклаве при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях нанесите необходимое количество бульона — 2–5 мл — на стерильную абсорбирующую ватную подложку для её насыщения.
6. Используйте среду в течение 24 ч после восстановления.

Методика проведения анализа

1. Насыщайте стерильную абсорбирующую ватную подложку примерно 2 мл HiCrome M-TEC бульона.
2. Пропустите пробу воды через мембранный фильтр.
3. Асептически поместите мембранный фильтр на насыщенную абсорбирующую подложку фильтруемой стороной вверх.
4. Инкубируйте подложку с мембранным фильтром при 44,5 ± 0,2 °C в течение 22–24 ч.
5. После инкубации учитывайте колонии E. coli на мембранном фильтре по пурпурной или пурпурно-фиолетовой окраске.

Культуральные характеристики и контроль качества

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 44,3–44,7 °C в течение 22–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Показатели среды:

• Внешний вид: однородный, свободно пересыпающийся порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор светло-янтарного цвета в пробирках.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 3,06 % масс./об. при 25 °C; pH 7,3 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,10–7,50.

Пробоотбор и обращение с образцами

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно действующим руководствам и локальным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения метода

1. β-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E. coli, однако отдельные штаммы E. coli могут давать отрицательную реакцию.
2. Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост из-за различий в пищевых потребностях.
3. Для подтверждения результатов необходимы дополнительные биохимические и серологические исследования.

Требования безопасности

Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой. При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Хранение и срок годности

• Хранение сухого продукта: при температуре 15–25 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение приготовленной среды: при температуре 2–8 °C.
• Хранение после вскрытия: в сухом виде, с плотно закрытой крышкой.
• Условия хранения: сухое проветриваемое помещение, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• Использование: до истечения срока годности, указанного на этикетке.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.

Продукт обладает гигроскопичностью. При неплотно закрытой упаковке или ненадлежащем хранении возможно образование комков. Приготовленную среду следует использовать в течение 24 ч после восстановления.

Рабочие характеристики среды гарантируются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах установленного срока годности и при хранении в рекомендованных условиях.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Сравнительный контекст

В отличие от обычных неселективных бульонных сред, HiCrome M-TEC содержит хромоген для визуального выявления колоний E. coli по пурпурно-фиолетовой окраске и селективные компоненты — лаурилсульфат натрия и дезоксихолат натрия.

Источник

https://www.himedialabs.com/in/m1713-hicrome-m-tec-broth.html