HiMedia M1713-500G HiCrome M-TEC бульон

Хромогенный бульон HiMedia M1713-500G HiCrome M-TEC для дифференциации и количественного определения термотолерантных штаммов E. coli в воде. Применяется методом мембранной фильтрации; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения

HiCrome® M-TEC Broth представляет собой модификацию агара M-TEC, разработанную по методу Dufour. В состав среды входит хромоген 5-бром-6-хлоро-3-индолил-β-D-глюкуронид, который расщепляется ферментом β-D-глюкуронидазой, вырабатываемым штаммами E. coli. В результате реакции образуется глюкуроновая кислота, которая придает колониям E. coli характерный пурпурно-маджентовый цвет.

Компоненты среды:

• Протеозо-пептон и дрожжевой экстракт: источники углерода, азота, длинноцепочечных аминокислот, витаминов и основных питательных веществ.
• Лактоза: ферментируемый углевод.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.
• Дигидрофосфат калия и гидрофосфат калия: создают мощную буферную систему для контроля pH при ферментативном действии.
• Лаурилсульфат натрия (SLS) и дезоксихолат натрия: повышают селективность среды, подавляя рост грамположительных бактерий.

Методика проведения анализа

1. Подготовка среды: суспендируйте 30,6 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды. При необходимости нагрейте для полного растворения.
2. Стерилизация: стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
3. Подготовка фильтра: охладите среду до 45–50 °C и асептически нанесите требуемый объем (2–5 мл бульона) на стерильную абсорбирующую хлопковую подушечку для насыщения.
4. Посев: мембранный фильтр, через который была пропущена проба воды, асептически помещают на насыщенную абсорбирующую подушечку лицевой стороной вверх.
5. Инкубация: инкубируйте при температуре 44,5 $\pm$ 0,2 °C в течение 22–24 часов.
6. Интерпретация: после инкубации E. coli образуют колонии пурпурного или маджентового цвета на мембранном фильтре.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,3 $\pm$ 0,2
• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный прозрачный раствор
• Диапазон pH: 7,10–7,50

Культуральные характеристики

Характеристики определены после инкубации при 44,3–44,7 °C в течение 22–24 часов.

Дополнительные параметры

Область применения

Среда предназначена для анализа проб воды. Используется в экологическом мониторинге и контроле качества воды для выявления термотолерантных колиформ.

Ограничения метода

• Фермент $\beta$-глюкуронидаза присутствует в 97 % штаммов E. coli; отдельные штаммы могут давать отрицательный результат.
• Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост из-за вариаций в питательных потребностях.
• Для окончательного подтверждения результатов необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C в сухом проветриваемом помещении.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок использования: готовая среда должна быть использована в течение 24 часов после восстановления.
• Особенности: продукт гигроскопичен; неправильное хранение может привести к образованию комков.

Меры предосторожности и утилизация

• При работе использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической лабораторной практики.
• Контаминированные материалы и использованные среды подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию перед утилизацией.