HiMedia M1713-100G HiCrome M-TEC бульон

Хромогенный бульон HiMedia M1713-100G HiCrome M-TEC для дифференциации и подсчёта термотолерантных штаммов E. coli в воде методом мембранной фильтрации. Применяется для анализа проб воды; позволяет идентифицировать целевые микроорганизмы по характерному пурпурно-малиновому цвету колоний.

Принцип измерения

Бульон HiCrome® M-TEC является модификацией агара M-TEC, разработанного по методу Dufour. В состав среды входит хромоген 5-бром-6-хлоро-3-индолил-β-D-глюкуронид, который расщепляется ферментом β-D-глюкуронидазой, вырабатываемым штаммами E. coli. В результате реакции образуется глюкуроновая кислота, которая придает колониям E. coli специфический пурпурно-малиновый цвет.

Компоненты среды:

• Протеозо-пептон и экстракт дрожжей: источники углерода, азота, длинноцепочечных аминокислот, витаминов и основных питательных веществ.
• Лактоза: ферментируемый углевод.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.
• Дигидрофосфат калия и гидрофосфат калия: создают мощную буферную систему для контроля pH при ферментативном действии.
• Лаурилсульфат натрия (SLS) и дезоксихолат натрия: повышают селективность среды, подавляя рост грамположительных бактерий.

Методика проведения анализа

1. Приготовление среды: суспендируйте 30,6 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды. При необходимости нагрейте до полного растворения.
2. Стерилизация: стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
3. Подготовка к посеву: охладите среду до 45–50 °C и асептически нанесите требуемый объем (2–5 мл бульона) на стерильный абсорбирующий хлопковый тампон для насыщения.
4. Посев: мембранный фильтр, через который была пропущена проба воды, асептически помещают на насыщенный тампон лицевой стороной вверх.
5. Инкубация: инкубируйте при температуре 44,5 $\pm$ 0,2 °C в течение 22–24 часов.
6. Интерпретация: после инкубации E. coli образуют колонии от пурпурного до малинового цвета на мембранном фильтре.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечный pH (при 25 °C): 7,3 $\pm$ 0,2
• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный прозрачный раствор
• Диапазон pH: 7,10–7,50

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 44,3–44,7 °C в течение 22–24 часов.

Дополнительные параметры

Область применения и ограничения

Среда предназначена для анализа проб воды.

Ограничения:

• Фермент $\beta$-глюкуронидаза присутствует в 97 % штаммов E. coli; отдельные штаммы могут давать отрицательный результат.
• Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост из-за вариаций в питательных потребностях.
• Для окончательного подтверждения результатов необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре 15–25 °C в плотно закрытом контейнере. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников воспламенения и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.
• Срок использования после восстановления: среда должна быть использована в течение 24 часов после разведения.

Меры предосторожности и утилизация

При работе со средой и культурами следует соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики. Использовать защитные перчатки, спецодежду и средства защиты глаз/лица.

Утилизация: загрязненные материалы и использованные препараты должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.