HiMedia M1713-100G HiCrome M-TEC бульон

Хромогенная питательная среда HiMedia M1713-100G HiCrome M-TEC бульон предназначена для дифференциации и количественного определения термотолерантных E. coli в воде методом мембранной фильтрации. Бульон используют для микробиологического анализа проб воды с инкубацией мембранного фильтра при 44,5 ± 0,2 °C в течение 22–24 ч; для подтверждения результатов необходимы дополнительные биохимические и серологические тесты.

Назначение

HiCrome M-TEC Broth — хромогенная питательная среда для обнаружения и количественного определения термотолерантных E. coli (TEC) в воде методом мембранной фильтрации.

Тип образца: пробы воды.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности среды.

Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2.

Принцип измерения и интерпретация

HiCrome M-TEC Broth представляет собой хромогенную среду, модифицированную на основе агара M-TEC, разработанного Dufour. В состав среды входит хромоген 5-бром-6-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронид, который расщепляется ферментом β-D-глюкуронидазой, образуемой штаммами E. coli. В результате колонии E. coli приобретают фиолетовую или пурпурно-фиолетовую окраску.

Функции компонентов среды:

• протеозопептон и дрожжевой экстракт обеспечивают источник углерода и азота, аминокислоты с длинной цепью, витамины и необходимые питательные вещества;
• лактоза является сбраживаемым углеводом;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие;
• калий дигидрофосфат и дикалий гидрофосфат образуют буферную систему, регулирующую pH при ферментативном сбраживании;
• лаурилсульфат натрия и дезоксихолат натрия повышают селективность среды за счёт ингибирования грамположительных бактерий.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 30,6 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях внесите необходимое количество бульона — 2–5 мл — на стерильную впитывающую ватную подложку для её насыщения.
6. Используйте среду в течение 24 ч после регидратации.

Методика проведения анализа

1. Насытьте стерильную впитывающую ватную подложку приблизительно 2 мл HiCrome M-TEC Broth.
2. После пропускания пробы воды через мембранный фильтр асептически поместите фильтр на насыщенную впитывающую подложку рабочей стороной вверх.
3. Инкубируйте подложку с мембранным фильтром при 44,5 ± 0,2 °C в течение 22–24 ч.
4. После инкубации оцените окраску колоний на мембранном фильтре: E. coli образует колонии от фиолетового до пурпурно-фиолетового цвета.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M1713-100G
• Назначение изделия: бульон
• Тип продукта: HiCrome™
• Физическая форма: порошок
• Происхождение: животное
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Масса: 100 г
• Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,10–7,50
• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор светло-янтарного цвета в пробирках
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 3,06 % масс./об. при 25 °C; pH 7,3 ± 0,2

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 44,3–44,7 °C в течение 22–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Сбор и обращение с образцами

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно действующим руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения метода

1. β-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E. coli, однако отдельные штаммы E. coli могут не продуцировать этот фермент и давать отрицательный результат.
2. Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост из-за различий в пищевых потребностях.
3. Для подтверждения результата необходимы дополнительные биохимические и серологические тесты.

Контроль качества

Эффективность среды ожидается при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных температурных условиях.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 15–25 °C.
• Условия хранения сухой среды: плотно закрытая ёмкость.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности продукта.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте ёмкость.
• Для сохранения рабочих характеристик используйте продукт в пределах установленного срока годности.

При получении продукта храните его при температуре 15–25 °C.

Меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими методами лабораторной работы.

Отличие методики

В отличие от неселективных питательных бульонов, HiCrome M-TEC Broth сочетает ингибирование грамположительных бактерий лаурилсульфатом натрия и дезоксихолатом натрия с хромогенной индикацией β-D-глюкуронидазной активности колоний E. coli.

Технические параметры продукта