HiMedia M1705-500G Модифицированный MUG желчный бульон с бриллиантовым зеленым

Бульон HiMedia M1705-500G Модифицированный MUG желчный бульон с бриллиантовым зеленым — сухая питательная среда для выявления Escherichia coli в пробах воды и пищевых продуктов флуорогенным методом. Среда предназначена для предположительной идентификации и подтверждения колиформных бактерий, а наличие газа и синей флуоресценции используют как признаки ферментации лактозы и активности β-глюкуронидазы.

Назначение и область применения

Модифицированный MUG-желчный бульон с бриллиантовым зелёным применяют для выявления Escherichia coli в пробах воды и пищевых продуктов флуорогенным методом. Среда используется для предположительной идентификации и подтверждения колиформных бактерий в воде, сточных водах, пищевых продуктах, молоке и молочных продуктах.

Рецептура разработана с учётом методик APHA для предположительной идентификации и подтверждения колиформных бактерий.

Состав

Состав на 1 л:

Конечный показатель pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Принцип действия и интерпретация результатов

Пептический перевар тканей животного происхождения служит источником основных питательных веществ. Лактоза является сбраживаемым углеводом. Триптофан используется для выявления индола.

Бычья желчь подавляет рост грамположительных бактерий, а бриллиантовый зелёный ингибирует грамотрицательные бактерии. Газ, образующийся при ферментации лактозы, выявляют с помощью перевёрнутой трубки Дюранта. Образование газа является положительным признаком фекальных колиформных бактерий, поскольку нефекальные колиформные бактерии, растущие в этой среде, газ не образуют.

При ослаблении ингибирующего действия желчи или бриллиантового зелёного в результате взаимодействия с компонентами пищевого материала грамположительные спорообразующие бактерии также могут образовывать газ.

Флуорогенное соединение MUG — 4-метилумбеллиферил-β-D-глюкуронид — обеспечивает быстрое выявление E. coli. При гидролизе MUG ферментом β-глюкуронидазой образуется синяя флуоресценция, которую наблюдают с использованием источника ультрафиолетового излучения длинноволнового диапазона.

Для усиления флуоресценции пластины подвергают воздействию паров аммиака согласно описанной методике.

При исследовании проб воды рост из предположительно положительных пробирок, в которых обнаружено газообразование в лактозном бульоне M026 или лаурилтриптозном бульоне M080, пересевают в желчный бульон с 2 % бриллиантового зелёного M121. Образование газа в течение 48 ± 2 ч подтверждает предположительно положительный результат.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 41,11 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагревайте суспензию до полного растворения.
3. Разлейте по 10 мл в пробирки, содержащие перевёрнутые трубки Дюранта.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин. Давление при стерилизации — 15 фунтов, ориентировочно 0,103 МПа.
5. Для анализа больших объёмов проб приготовьте концентрированную среду с учётом объёма исследуемой пробы.

Контроль качества

Внешний вид сухой среды

Светло-жёлтый или светло-зелёный однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор изумрудно-зелёного цвета без осадка.

Реакция среды

Реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 4,11 % при 25 °C.

Показатель pH: 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Технические характеристики

Условия хранения

Хранить сухую среду в плотно закрытой ёмкости при температуре ниже 30 °C. Приготовленную среду хранить при 2–8 °C. Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.