ХайХром бульон для обнаружения колиформных бактерий в воде HiMedia M1663-500G (уп/500 гр)

Селективная питательная среда ХайХром бульон для обнаружения колиформных бактерий в воде HiMedia M1663-500G (уп/500 гр) — сухой порошкообразный бульон с конечным pH 7,0 ± 0,2. Бульон применяется для определения наличия или отсутствия колиформных бактерий в воде, при этом приготовленную среду нельзя автоклавировать.

Назначение

HiCrome™ PA Broth предназначен для обнаружения наличия или отсутствия колиформных бактерий в воде. Среда применяется в лабораториях пищевой микробиологии и при контроле безопасности воды.

Принцип действия и интерпретация результатов

Исследование воды на наличие маркерных групп микроорганизмов, включая колиформные бактерии, является распространённым методом микробиологического контроля. Обнаружение колиформных бактерий в воде, заявленной как прошедшая обработку для обеспечения безопасности, указывает на неэффективность процесса обработки.

HiCrome™ PA Broth представляет собой модификацию среды, первоначально разработанной Hajna и Perry, и используется для обнаружения наличия или отсутствия колиформных бактерий в воде.

Флуорогенное соединение 4-метилумбеллиферил β-D-глюкуронида (MUG) включено в состав среды для флуорогенного обнаружения Escherichia coli — основного индикаторного микроорганизма фекального загрязнения воды. Фермент β-глюкуронидаза, продуцируемый Escherichia coli, гидролизует MUG с образованием флуоресцирующего конечного продукта 4-метилумбеллиферона. Флуоресценцию выявляют при наблюдении среды в ультрафиолетовом свете.

MUG также позволяет выявлять анаэрогенные штаммы, которые могут не обнаруживаться при использовании традиционной методики.

Тест с 2-нитрофенил β-D-галактопиранозидом (ONPG) используют для определения наличия или отсутствия β-галактозидазы у микроорганизмов. Тест важен для дифференциации представителей семейства Enterobacteriaceae, которых обычно классифицируют по способности ферментировать лактозу.

ONPG имеет структуру, сходную со структурой лактозы. Для демонстрации ферментации лактозы необходимы два фермента: пермеаза и β-D-галактозидаза. Истинные неферментирующие лактозу микроорганизмы не имеют ни одного из этих ферментов. Микроорганизмы с поздней ферментацией лактозы не имеют пермеазы, но обладают β-галактозидазой.

При наличии β-галактозидазы бесцветный ONPG расщепляется на галактозу и о-нитрофенол — жёлтое соединение. Положительная реакция ONPG сопровождается появлением жёлтой окраски.

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих параметров.

Функции компонентов

• Ферментативный гидролизат казеина: источник необходимых питательных веществ.
• Лактоза: сбраживаемый углевод.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотическое равновесие.
• Буферная система: регулирует pH при ферментативном сбраживании.
• Соли желчных кислот: подавляют грамположительные бактерии, особенно виды Bacillus и фекальные стрептококки.
• MUG: субстрат для флуорогенного выявления β-глюкуронидазной активности.
• ONPG: субстрат для определения β-галактозидазной активности и ферментации лактозы.

В большинстве случаев β-глюкуронидазная активность проявляется в течение 4 ч, однако для некоторых слабоположительных по β-глюкуронидазе штаммов требуется инкубация в течение ночи.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 37,35 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте приготовленную среду.
4. Охладите среду до 50 °C.
5. Разлейте среду в стерильные пробирки.

Контроль качества

Внешний вид сухой среды

Однородный свободно текучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор светло-янтарного цвета без осадка.

Реакция среды

Реакция водного раствора концентрацией 3,7 % м/об при 25 °C: pH 7,0 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Технические характеристики

• Тип питательной среды: элективная.
• Назначение изделия: бульон.
• Физическая форма: порошок.
• Происхождение: животное.
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE).
• Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2.
• Рабочий диапазон pH: 6,80–7,20.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705.
• Фасовка: 500 г.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого порошка: 2–8 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Техническое отличие методики

В среде одновременно применяются ONPG для выявления β-галактозидазной активности по жёлтой окраске и MUG для флуорогенного выявления β-глюкуронидазной активности Escherichia coli при освещении ультрафиолетом с длиной волны 366 нм.